Что значит реактивность ифа. ИФА на сифилис: методика проведения анализа, расшифровка, причины ложноположительных результатов

Когда назначают анализ сдавать анализ ИФА на сифилис. Методы лабораторной диагностики. Результаты анализа — как определить норму и отклонения. Стоимость иммуноферментного анализа.

Как правило, постоянно при обращении в поликлинику, доктора назначают сдавать разные анализы. Это позволяет им определить инфекции и заболевания, которыми страдает человек. ИФА или так называемый иммуноферментный анализ, это прекрасный способ оценить иммунную систему организма, и выявить по наличию антител инфицирование и стадию болезни.

Итак, кому назначают сдавать данный анализ и что такое иммуноферментный анализ? Доктора выписывают этот анализ, если у человека проявляются следующие заболевания:

  • Сыпь на теле – аллергические реакции.
  • Вирусы – герпес, цитомегалавирус.
  • Болезни, передаваемые половым путем – сифилис, трихомонада.
  • Патология, связанная с онкологическим заболеванием.
  • Нейросифилис.

Кроме перечисленных заболеваний, анализ назначается для определения уровня гормона в крови. По результатам проводится оценка качества терапии. Что такое сифилис знает наверно каждый человек, но не представляет его масштабы, и сколько человек инфицированных ходят рядом с нами.

В настоящее время сифилис – это самое распространенное заболевание. Это трепонома, которая поражает организм человека. И в результате затрагиваются все внутренние органы заболевшего.

Это очень опасная инфекция, и частенько бывает, что она может долгое время себя не проявлять. Поэтому человек может быть носителем и распространителем большое время, не зная, что он болен.

Метод лабораторной диагностики

Медицина не стоит на месте, современные анализы, стали существенно отличаться от старых методов исследования организма. Хотя они прекрасно выполняли свою роль, но порой приходилось ждать результаты неделями и месяцами. Это естественно не было благоприятно для инфицированного человека. Что такое ожидание результата, прошел на себе больной человек.

Классические анализы – выявления сифилиса методом Вассермана, методом Кана стали сдавать свои позиции и на смену пришли такие тесты как ИФА.

Это самый современный метод обнаружения инфицирования у человека. Результат расшифровывается с помощью компьютера. Это позволяет более точно определять положительный результат или отрицательный анализ.

Читайте также по теме

Что такое ИППП? Симптомы, лечение

Во время проведения расшифровки производится поиск антител к конкретным заболеваниям. И в результате проведения анализа, можно было выявить заражение, когда результат был положительным. Используя ИФА для выявления сифилиса подразумевается трёхклассное применение иммуноглобулинов:

  • G, M, A – для диагностики имеют самое важное значение.
  • Они вырабатываются в инфицированном человека строго в определенной последовательности.
  • Быстро определяют стадию инфицирования.

Результаты ИФА – норма и положительный анализ

Если говорит об анализе ИФА на сифилис, то в этом случае сложно сказать, что есть норма или отклонение. Результат, как правило бывают или отрицательный, или положительный. Кроме этого существуют титры, определяющие количество антител в крови.

Существует много тонкостей при расшифровке анализа, если он показал положительный результат, анализ все равно придется пересдавать несколько раз, чтобы исключить метод ложноположительной реакции.

Как уж писалось тонкостей при расшифровке анализа очень много, и определить результат сможет только лечащий врач. Приведём примеры в таблице, какие могут быть показаны результаты на иммуноферментный анализ:

Не стоит отчаиваться, если анализ показал положительный результат. Как правило, проводят дополнительные анализы и тесты, различными способами, для более точного установления диагноза.

Стоимость иммуноферментного анализа

Как правило, стоимость данного анализа напрямую зависит от самого анализа и выявление конкретной инфкекции. Определение маркеров на инфицирование различных видов стоит от 200 до 350 рублей. И проводится такой анализ в течение двух суток.

ИФА наиболее популярный и современный метод диагностирования организма. Метод показал свою эффективность в выявлении инфицирования, и определения точного срока заражения.

Учитывая ценовую политику можно сказать, что анализ доступен каждому человеку с любым бюджетом. Он позволяет лечащему врачу получить полную картину инфицирования человека. Он показал себя в деле и не разочаровал докторов. В то же время получив анализ, лечащий врач мог реагировать оперативно, назначая своевременно лечение.

Для комплексной оценки состояния организма (в частности его защитных функций) назначается иммуноферментный анализ крови (ИФА). ИФА анализ крови выполняется для диагностики инфекционных, аутоиммунных, гематологических патологий, первичных и вторичных иммунодефицитов. В данной статье предлагаем рассмотреть более подробно, что являет собой анализ крови методом ИФА, а также какие существуют показания для его проведения.

Показания к назначению анализа крови методом ИФА и принцип его действия

Как мы уже отметили, анализ крови методом ИФА - это лабораторное исследование, посредством которого определяются антигены или антитела в пробе крови. Данный анализ применяется для выявления уровня гормонов, иммунологических комплексов и иммуноглобулинов. Существуют следующие показания для сдачи ИФА анализа:

  • Диагностирование аллергий.
  • Диагностирование болезней вирусного происхождения – Эпштейн-Барр вирус, герпес, гепатиты, цитомегаловирус.
  • Диагностика инфекций, передающихся половым путем – микоплазма, уреаплазма, сифилис, трихомонада, хламидиоз.
  • Определение иммунодефицита.
  • Диагностика онкологических патологий.
  • Оценка эффективности терапии.
  • Определение уровня гормонов.
  • Предоперационное комплексное обследование.

Принцип действия иммуноферментного анализа крови основан на исследовании крови на наличие иммуноглобулинов (специфических белков-антител). Иммуноглобулины вырабатываются иммунитетом при попадании в организм человека антигенов (чужеродных микроорганизмов). Эти иммунные молекулы связываются с различными инфекционными возбудителями и нейтрализуют их. Важной отличительной чертой, которой обладают иммуноглобулины, является их специфичность. Благодаря таким характеристикам они могут образовывать комплекс антиген-антитело, связываясь с определенным антигеном. Во время выполнения анализа крови ИФА именно этот комплекс определяют количественно и качественно.

Для проведения данного исследования зачастую используют кровь человека. Однако в качестве материала для анализа можно брать содержимое стекловидного тела, околоплодные воды, спинномозговую жидкость. Проба крови, как правило, берется из локтевой вены пациента. Кровь рекомендуется сдавать натощак (должно пройти не менее 12 часов со времени последнего приема пищи). Если пациент принимает лекарственные средства необходимо сообщить врачу, поскольку некоторые из них могут повлиять на результат анализа. Также на достоверность результатов анализов влияет прием наркотиков и алкоголя.

Расшифровка анализа крови на ИФА

В бланке данного анализа обычно указывается отрицательный (-) или положительный (+) результат вычисления каждого класса иммуноглобулинов.

Предлагаем рассмотреть интерпретацию вероятной расшифровки анализа крови на ИФА.

  • IgG, IgA не определяются и результат IgM отрицательный – полное выздоровление.
  • Результат IgM, IgA, IgG отрицательный – иммунитет к инфекции отсутствует.
  • Результат IgG, IgA положительный и отрицательный, а также результат IgM положительный – наличие острой инфекции.
  • Положительный результат IgG и отрицательный результат IgA и IgM –поствакцинальный или постинфекционный иммунитет.
  • Положительный или отрицательный результат IgG, IgA и отрицательный результат IgM – хроническая инфекция.
  • Результат IgG, IgM, IgA положительный – обострение хронической инфекционной патологии.

В иммуноферментном анализе крови кроме уточнения классов антител в расшифровке указываются количественные их показатели. Однако обширное их объяснение предоставляет только лечащий доктор.

Достоинства и недостатки данного исследования

  • Относительно небольшая стоимость.
  • Удобство в работе.
  • Возможность проведения диагностики на ранней стадии предполагаемого заболевания.
  • Относительно высокая точность полученных данных.
  • Небольшой промежуток времени, требуемый для получения результата исследования.
  • Возможность отслеживания динамики развития инфекционного процесса в организме.
  • Высокий уровень унификации, благодаря чему возможно проведение массовых обследований.
  • Автоматизация всех этапов исследования.

Недостатком ИФА анализа крови является то, что он может в достаточно редких случаях давать ложноположительные или ложноотрицательные результаты. Также при проведении исследования помимо технических ошибок, причиной ложных результатов у пациента может послужить ревматоидный фактор, наличие у него хронических заболеваний (при которых вырабатываются антитела), прием некоторых лекарственных медицинских препаратов, нарушения обмена веществ.

  • Лямблиоз.
  • Аскаридоз.
  • Цистицеркоз.
  • Амебиаз.
  • Трихинеллез – исследование проводят не один раз, на 4–12 неделе после инфицирования определяется максимальный уровень антител.
  • Тениоз.
  • Описторхоз – выполняют дифференциальную диагностику между острой и хронической формой болезни.
  • Токсоплазмоз.
  • Фасциолез – в острой стадии болезни определяется наличие антител.
  • Кожный или висцеральный лейшманиоз.

Итак, можно подытожить: сдать анализ ИФА на паразитов необходимо для выявления антигенов (продуктов жизнедеятельности паразитов и само их наличие), а также антител (иммуноглобулинов). Специфичность данного метода исследования при определении паразитов согласно статистическим данным составляет около 90%. Благодаря этому анализу врач может в точности установить вид паразитов, их общее количество, а также проследить динамику развития патологических процессов благодаря уровню антител.

Иммуноферментный анализ крови – метод диагностики, который практикуется для выявления гельминтов у детей и взрослых.

Показание к проведению

Врачи назначают выполнение ИФА на инвазию в следующих случаях:

  • число лейкоцитов у пациента существенно превышает норму при отсутствии симптоматики других патологий;
  • беспокоят частые головокружения или головные боли без очевидных причин;
  • возникают аллергические реакции;
  • одолевают мышечные боли, упадок сил;
  • долго не излечивается кашель;
  • временами появляется лихорадочное состояние;
  • у домашних животных выявляется наличие глистов;
  • в регионе проживания ухудшается эпидемиологическая ситуация;
  • профессия пациента связана с высоким риском заражения глистами (проводится плановая диагностика).

  • расстройства пищеварения с изменением стула и его периодичности;
  • боли в животе;
  • колики в области печени;
  • тошнота, переходящая в рвоту;
  • признаки поражения центральной нервной системы: бессонница, повышенная нервозность, резкие перепады настроения.

Виды ИФА

Ферментативная реакция позволяет изучать установленные лаборантами виды гельминтов с визуальным измерением данных о них.

В лабораториях практикуются различные виды ИФА:

Как сдавать

Чтобы результаты исследования оказались максимально достоверными, следует неукоснительно выполнять все требования лаборатории. Необходимо:

  • за 3 суток до сдачи крови прекратить прием всех медикаментов, кроме жизненно необходимых;
  • за 2 суток приостановить физиотерапевтические процедуры;
  • за 1 сутки отказаться от алкоголя и кофе;
  • накануне не подвергаться физическим нагрузкам и эмоциональным стрессам;
  • поужинать не позднее 19-20 часов (утром можно выпить немного воды).

Расшифровка

Вариант №1. IgM-, IgA+, IgG-: первичное заболевание (2 недели с момента инфицирования).

Вариант №2. IgM+, IgA+, IgG-: первичная болезнь (2,5-3 недели со времени заражения).

Вариант №3. IgM+, IgA+, IgG+: первичная инфекция (3-4 недели с момента заражения).

Вариант №4. IgM-, IgA+, IgG+: обострение хронической болезни (2 недели от начала обострения).

Вариант №5. IgM-, IgA+/-, IgG+: хроническая фаза.

Вариант №6. IgM-, IgA-, IgG+: вылеченная (прошедшая) инфекция, наличие иммунитета.

Вариант №7. IgM-, IgA, IgG не определяются (или снижение титра в 2-4 раза по окончании лечения, в 5-8 раз через 1-1,5 месяца после лечения): выздоровление.

Вариант №8. IgM-, IgA-, IgG-: отсутствие иммунитета к инфекции.

Преимущества и недостатки

Крайне редко тест выдает ложноположительные или ложноотрицательные результаты. Причинами этого недостатка могут оказаться технические ошибки. Такие результаты возможны при ревматоидном факторе, при нарушениях обмена веществ и других хронических заболеваниях, вследствие которых вырабатываются защитные антитела, а также при приеме некоторых препаратов, например инсулина.

Методом ИФА определяются:

  • ленточные черви (свиные цепни);
  • круглые черви (аскариды, острицы, токсокары, стронгилоидиты);
  • плоские черви (цестоды, сосальщики, нематоды);
  • трихинеллы;
  • к аскаридам – 935 руб.;
  • к токсоплазмам – 715-1000 руб.

Трепонемные тесты на сифилис. Общее описание.

При проведении диагностических тестов на сифилис, применяются различные серологические реакции : агглютинации, преципитации, иммунофлюоресценции, связывания комплемента, иммуноферментный анализ и др. В основе всех этих серологических реакций лежит взаимодействие антигенов и антител .

Специфические серологические тесты называются трепонемными потому, что в этих тестах используются бледные трепонемы или их антигены, то есть антигены трепонемного происхождения.

Цель трепонемных тестов - выявление специфических антител к антигенным структурам возбудителя сифилиса, то есть антител, направленные конкретно против самих бактерий T.

Pallidum, а не против тканей организма, поврежденных трепонемой. Специфические противотрепонемные антитела класса IgM могут быть обнаружены уже в конце второй недели заболевания.

Как и в нетрепонемных тестах , при проведении трепонемных тестов используется реакция «антиген-антитело». Для проведения и обнаружения результатов реакции «антиген-антитело» используют более сложные и дорогие методы, чем в случае нетрепонемных тестов.

Своевременное и качественное распознавание сифилитической инфекции связывается в настоящее время с широким внедрением трепонемных тестов.

Трепонемные тесты используют, чтобы подтвердить наличие сифилиса - с их помощью проверяют результаты нетрепонемных тестов, что особенно необходимо при диагностике скрытых форм сифилиса . Трепонемные тесты также применяются для выявления сифилиса на ранних стадиях, когда нетрепонемные кардиолипиновые тесты (реакция Вассермана, реакция микропреципитации и др.) отрицательные.

Трепонемные тесты применяются только для диагностики сифилиса и не используются для проведения контроля излеченности, т/к трепонемные реакции у некоторых больных могут оставаться положительными в течение многих лет после полноценного лечения сифилиса.

Однако, при проведении трепонемных тестов, в небольшом числе исследований могут встречаться ложноположительные результаты , особенно при наличии у пациента таких заболеваний, как инфекционный мононуклеоз, болезни соедининтельной ткани, лепра или инъекционная наркомания.

По клинической специфичности трепонемные тесты сопоставимы с нетрепонемными, по клинической чувствительности – превосходят их.

Причины ложноположительных результатов

Реакция Вассермана может определять «острый» и «хронический» ложноположительный результат. Его выраженность зависит от характера изменений состояния человека. Показывать стадию обострения RW может в таких случаях:

  • инфекционные заболевания в стадии обострения;
  • травматические повреждения;
  • инфаркт миокарда;
  • введение любой вакцины за несколько дней до пробы;
  • пищевое отравление.

Типы анализов на сифилис

Диагностика сифилиса имеет некоторые особенности и отличается от диагностики других бактериальных инфекций. Сложное строение и антигенные свойства бледной трепонемы обусловливают ошибки в интерпретации результатов серологических реакций.

Сдать анализ крови на сифилис предлагают 3 основным группам пациентов:

  1. 1 Скрининг и диспансеризация групп населения (в том числе и беременность, постановка на учет в женской консультации, поступление на работу и оформление медкнижки и так далее).
  2. 2 Скрининг в группах риска (незащищенные половые контакты с человеком, инфицированным сифилисом, лица после принудительных сексуальных контактов, ВИЧ-инфицированные и так далее).
  3. 3 Лица, имеющие симптомы заболевания, или лица с подозрением на сифилитическую инфекцию.

Все лабораторные методы условно подразделяют на прямые и непрямые.

Прямые методы

  1. 1 Идентификация Treponema pallidum в тёмном поле (темнопольная микроскопия).
  2. 2 Заражение подопытных животных (культивирование в лабораторных животных).
  3. 3 ПЦР (полимеразно-цепная реакция).
  4. 4 ДНК-зонд или гибридизация нуклеиновых кислот.

Непрямые методы

Серологические реакции — это методы лабораторной диагностики, базирующиеся на обнаружении антител (сокращенно АТ) к антигенам бледной трепонемы (сокращенно АГ). Они имеют основное значение для подтверждения диагноза.

  1. 1 Нетрепонемные тесты:
    • Реакция Вассермана (РСК);
    • Реакция микропреципитации (МР, РМП) и ее аналоги, которые приведены ниже;
    • Тест быстрых плазменных реагинов (RPR, РПР);
    • Тест с красным толуидином и сывороткой (TRUST);
    • Нетрепонемный тест Лаборатории исследования венерических болезней — VDRL.
  2. 2 Трепонемные тесты:
    • Р-ция иммобилизации Treponema pallidum – РИБТ/РИТ;
    • Р-ция иммунофлюоресценции – РИФ, FTA (разведения сывороток РИФ-10, РИФ-200, РИФ-абс);
    • Р-ция пассивной гемагглютинации (РПГА, ТРПГА, TPHA);
    • Иммуноферментный анализ (ИФА, EIA);
    • Иммуноблоттинг.


Рисунок 1 — Алгоритм серодиагностики сифилиса

Гистоморфологические методы

Эти методы сводятся к выявлению особенностей гистоморфологии сифилитических проявлений. Внимание уделяется тонкостям строения твёрдого шанкра.

Однако, дифференциальная диагностика инфекции с помощью гистологии весьма затруднительна. Гистоморфология используется с другими лабораторными и клиническими тестами.

Методы клинических исследований стремительно совершенствуются с каждым годом. С разработкой новых способов диагностики, ложноположительная реакция на сифилис встречается всё реже.

При необходимости диагностика может включать в себя несколько разных методик – это позволяет получить наиболее достоверный результат.

Нетрепонемные методы исследования

Эти методики направлены на выявление белков, которые образуются в результате активности бледной спирохеты. Они направлены на определение «следов» возбудителя.

Такие методы имеют относительно высокий процент погрешности (до 10%). Подобные методики являются неспецифичными, но позволяют по титру антител определять степень заражения.

Реакция Вассермана RW

Наиболее распространённым анализом, который проводится для выявления бледной трепонемы, является серологическое исследование крови. Реакция Вассермана позволяет всего за несколько минут определить наличие болезни.

Поэтому данная методика применяется в лабораториях чаще всего – она не требует много времени и имеет относительно низкую стоимость.

Для выполнения анализа используется спинномозговая жидкость или кровь. Забор исследуемого материала может осуществляться из пальца (если анализ всего один) или из вены (если требуется проведение нескольких исследований).

В результате проведения анализа может быть не только ложноположительный, но и ложноотрицательный. Он возможен при следующих обстоятельствах:.

  • ранняя стадия заражения, когда количество трепонем в организме ещё низкое;
  • хроническое заболевание в стадии затихания, когда число антител снижается.

Для выявления болезни используют различные методики и биоматериалы. На ранних этапах сифилис определяют с помощью бактериоскопического теста.

Образцы исследуют под микроскопом. Прибор позволяет обнаружить штаммы возбудителя.

Позднее проводят серологические анализы. Благодаря им, в пробах выявляют антигены и антитела к болезни.

Способы определения половой инфекции поделены на 2 категории:

  • Прямые, выявляющие патогенный микроорганизм. К ним относят: темнопольная микроскопия, RIT-анализ (инфицирование кроликов биоматериалом для исследования), метод ПЦР – полимеразной цепной реакции (с его помощью находят генетические элементы возбудителя).
  • Непрямые (серологические) позволяют обнаружить антитела к патогену. Они продуцируются иммунной системой, как ответная реакция на заражение.

Серологические методики поделены на 2 категории: трепонемные и нетрепонемные.

Нетрепонемные, включающие: тест с толуидиновым красным, анализ РСК, RPR- тест, исследование крови экспресс-методом РМП.

Трепонемные, объединяющие: иммуноблоттинг, РСК-тест, РИТ-анализ, исследование РИФ, РПГА-тест, ИФА-анализ.

Информативность тестов на инфекцию различна. Чаще делают основные виды анализов на сифилис, к которым отнесены серологические методики. Пациентам, нуждающимся в обследовании, врач назначает тесты индивидуально.

Биоматериал для исследования

Чтобы выявить бледную трепонему – патогена, который выглядит, как спираль и вызывает сифилис, берут пробы:

  • венозной крови;
  • ликвора (секрета из спинномозгового канала);
  • содержимое лимфатических узлов;
  • ткани изъязвлений.

Если необходимо провести тесты на обнаружение сифилиса, кровь сдают не только из локтевой вены, но и из пальца. На выбор биоматериала и способ исследования влияет тяжесть течения инфекции и оснащенность диагностического центра.

Лабораторные анализы на выявления трепонемы называются серодиагностикой. Серодиагностика сифилиса условно подразделяется на две группы:

  • Специфические анализы, дающие положительную пробу даже после излечения заболевания;
  • Неспецифические анализы, показывающие результат, при наличии в конкретное время заболевания.

Как называется анализ на сифилис? Исследования в зависимости разделают на 2 группы:

Специфические анализы:

  • Сифилис рпга, что расшифровывается как реакция пассивной агглютинации или сифилис трна, что переводится - Treponema pallidum haemagglutination;
  • РИФ или реакция иммунофлюоресценции;
  • РИТ или реакция иммобилизации трепонем;
  • Иммуноферментный анализ;
  • Иммуноблот на сифилис или иммуноблоттинг;

Наиболее известны следующие трепонемные тесты:

  • Реакция связывания комплемента (реакция Вассермана) с трепонемным антигеном (РСКт).
  • Реакция иммунофлюоресценции (РИФ; Fluorescent treponemal antibody, FTA). Она применяется в нескольких модификациях: РИФ-200 (FTA-200); РИФ-абс (FTA-abs; FTA-abs double staining; FTA-abs IgM; РИФ-абс-IgM; 19S-IgM-FTA-abs); РИФц - реакция иммунофлюоресценции с цельной кровью.
  • Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА; Treponema pallidum haemagglutination assay, TPHA).
  • Реакция пассивной агглютинации желатиновых частиц, сенсибилизированных антигенами возбудителя сифилиса (TPPA, Treponema pallidum particle agglutination assay)
  • Иммуноферментный анализ (ИФА; Enzyme Lynced Immunosorbent Assay, ELISA).
  • ИХЛ - иммунохемилюминесцентное исследование (ИХЛ; Chemiluminescence immunoassays, CLIA)
  • Реакция иммобилизации бледных трепонем РИБТ (РИТ), в зарубежной литературе TPI (Treponema pallidum immobilization test). В последние годы используется все реже и только в научных целях и в исследовательских лабораториях.
  • Иммуноблотинг (ИБ; Western Blot, Line Blot). Как правило, используется метод линейного иммуноблотинга, являющийся вариантом иммуноферментного анализа. Применяется в двух вариантах: для выявления IgG и IgM-антител к возбудителю сифилиса

Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА) и иммуноферментный анализ (ИФА) на антитела классов IgM, IgG и суммарные имеют универсальное значение и применяются как для скрининга, так и для подтверждения диагноза.

Эти методики просты и доступны в проведении, имеют высокую воспроизводимость, автоматизированы. При применении ИФА или РПГА обязательным условием является использование в повторном анализе той же тест-системы, что и при первичном обследовании.

РИФ (fluorescent treponemal antibody, FTA) основана на визуализации при люминесцентной микроскопии комплексов антигенов с антителами с помощью сыворотки против Ig человека, меченной флюорохромом.

Методы РИФ, ИФА, иммуноблоттинг (ИБ) позволяют выявить специфические антитела к антигенам T. pallidum (при сифилисе результаты тестов становятся положительными) с 3-й недели от момента заражения и ранее, РПГА и РИБТ – с 7–8-й недели.

Из наиболее распространенных специфических трепонемных тестов в мировой практике, в которых используется реакция агглютинации, можно перечислить следующие. В РПГА (Treponema pallidum hemagglutination assay, ТРНА), реакции микрогемагглютинации (microhemagglutination assay for Treponema pallidum, MHA-TP) при положительном результате происходит агглютинация эритроцитов, сенсибилизированных (обработанных) трепонемным антигеном, в присутствии антитрепонемных антител. Использование в качестве носителя латекса или желатиновых частиц в тесте ТРРА (Treponema pallidum particle agglutination) позволяет применять нагрузочный тест в случае лизиса эритроцитов (распада эритроцитов из-за разрушения их мембраны) сыворотками некоторых больных, а также придает стабильность реагентам.

Трепонемные тесты

Антиген Улавливающая система Тест

Живые патогенные трепонемы

Взвесь живых трепонем

РИТ, РИБТ (реакция иммобилизации бледных трепонем)

Интактные трепонемы Трепонемы, фиксированные на стеклах

РИФ (реакция иммунофлуоресценции), РИФ-абс (РИФ с абсорбцией), РИФ-ц, РИФ с капиллярной кровью из пальца и т.п.

Очищенные и разрушенные ультразвуком трепонемы Связаны с эритроцитами РПГА (реакция пассивной гемагглютинации)
Связаны с желатиновыми частицами Реакция агглютинации частиц (TPPA)
ИФА
Иммуноблоттинг
Рекомбинантные Связаны с поверхностью лунок микропланшета Рекомбинантный ИФА

Белки, разделенные методом электрофореза в полиакриламидном геле и перенесенные на мембраны методом вестерн-блоттинга

Иммуноблотинг с рекомбинантными АГ
Связаны с частицами латекса Латекс-агглютинация

Диагностировать болезни возможно посредством прямых и непрямых способов. Сама бледная трепонема выявляется только прямым методом.

Непрямой же метод обнаруживает антитела к спирохете. Если найдены антитела, то это подтверждает наличие спирохеты в организме.

К непрямым способам диагностики относятся серологические реакции, объектом исследования которых является сыворотка крови.

Антитела можно обнаружить в процессе их контактирования с антигенами. Поэтому для проведения серологической реакции употребляются вещества с содержанием заданного антигена. По типу данного антигена реакции подразделяются на трепонемные и нетрепонемные:

  • Трепонемная реакция проходит с выявлением антител к антигенам трепонемы.
  • К нетрепонемным относятся реакции, обнаруживающин антитела к липопротеидам разрушенных трепонем или клеток человеческого организма.

Важно! Так как последние мало чем отличаются от липопротеидов тканей животных, то итог анализа на сифилис может оказаться ложноположительным. Кардинально подтвердить диагноз заболевания может только положительная трепонемная реакция.

Подтверждаем или исключаем сифилис: анамнез, симптомы, анализы

Подтвердить или исключить диагноз может только дерматовенеролог. Уролог или гинеколог могут лишь заподозрить болезнь по внешним признакам. И тогда они должны направить пациента к дерматовенерологу для дальнейшего обследования, лечения и наблюдения.

Диагноз «сифилис» основывается на совокупности следующих признаков:

  1. На наличии или отсутствии внешних проявлений и симптомов.
  2. На результатах минимум двух лабораторных исследований: нетрепонемного (РМП , или RW , или RPR ) и трепонемного (РПГА или ИФА ) тестов.
  3. На данных о том, был ли сифилис ранее, и проводили ли уже его лечение.

Если симптомы присутствуют

Основные тесты на сифилис - RPR и РПГА
  • Наиболее очевидным и обоснованным диагноз считается тогда, когда имеются клинические симптомы и подтверждающие результаты двух анализов: RPR (или RW , РМП ) и РПГА (или ИФА ).
  • Если же при наличии симптомов результаты анализов расходятся, и RPR отрицательный, а РПГА (или ИФА ) положительный, проводят дополнительный трепонемный тест - ИФА (или РПГА , если вначале проводился ИФА ). В случае положительного дополнительного анализа диагноз считается доказанным и проводится лечение, в случае отрицательного - кровь отправляют в экспертную лабораторию.
    Отрицательный RPR при положительном ИФА/РПГА встречается обычно в позднем периоде. Тогда на наличие инфекции обязательно исследуют спинномозговую жидкость (РИФ-ц, РИТ ).
  • Обратная ситуация, когда RPR положительный, а РПГА отрицательный (или сомнительный) встречаются крайне редко. Это возможно в первые 3–4 недели после появления твердого шанкра, а также во вторичном периоде во время иммунной «прозоны» (чрезмерно большого количества антител). В этом случае анализ рекомендуется повторить.

Если внешних признаков нет

Тогда диагностика усложняется. Здесь врачи опираются только на анализы и сведения о проводимом или непроводимом ранее лечении.

Варианты в этом случае:

  • Если нетрепонемный (один из РМП/RW/RPR ) и трепонемный тест (РПГА/ИФА ) - положительны, проводится дополнительный альтернативный трепонемный тест (ИФА , если первый тест был РПГА , и наоборот - РПГА , если был ИФА ). Если тест становится отрицательным, то кровь пациента направляют в экспертную лабораторию и проводят дополнительные анализы. В случае если второй трепонемный тест становится положительным, ставят диагноз: «скрытый сифилис».Такое состояние может наблюдаться некоторое время после проведенного лечения. Если пациенту было проведено до этого лечение, то для того чтобы подтвердить диагноз, проводят дополнительное исследование на I gM . При положительных результатах - диагноз подтверждается, но исследование все равно рекомендуется повторить через 2 недели. При отрицательных результатах сифилис опровергается.
  • Если нетрепонемный тест (РМП/RW/RPR ) отрицательный, а трепонемный (РПГА/ИФА ) положительный, то состояние может оцениваться как «поздний сифилис» или «отсутствие сифилиса», если пациенту было проведено ранее полноценное лечение. Для разграничения этих двух состояний проводят дополнительный тест на I gM (ИФА I gM , РИФ -абс-I gM , Иммуноблоттинг-I gM ). Если I gM в крови имеются, ставят «поздний сифилис» и лечат. Если нет - пациент считается здоровым.
  • Если RPR (или RW/РМП ) положительный, РПГА положительный, а ИФА отрицательный (или наоборот: РПГА «-» и ИФА «+»), то результаты анализов вызывают сомнение и рекомендуется отправить кровь в экспертную лабораторию или провести альтернативные анализы (РИФ , Иммуноблоттинг).
  • Если нетрепонемный тест (PMП/RW/RPR ) положительный, а трепонемный (РПГА/ИФА ) отрицательный, то проводится дополнительный трепонемный тест (ИФА/РПГА ). Если он дает положительный результат, то кровь направляют в экспертную лабораторию. Если отрицательный, то диагноз опровергается, а результат нетрепонемного теста признается ложноположительным.

Классификация методов лабораторной диагностики

Серологическая диагностика помогает врачу изучать динамику образования антител в организме больного сифилисом в начальных стадиях заболевания, в период лечения и после его окончания, решить вопрос рецидив заболевания у больного или повторное заражение (реинфекция), поставить диагноз сифилиса при массовых медицинских условиях.

Антитела к бледной трепонеме IgM

Первыми после заражения начинают вырабатываться антитела IgM. Они начинают выявляться при помощи серологических реакций уже со второй недели после заражения.

На 6 - 9 неделях заболевания их количество становится максимальным. Если больной не лечился, то антитела исчезают через полгода.

Антитела IgM исчезают через 1 - 2 мес. после лечения раннего сифилиса, через 3 - 6 мес.

После лечения позднего сифилиса. Если регистрируется их рост, то это служит признаком рецидива сифилиса или говорит о повторном заражении.

Молекулы IgM крупные и через плаценту к плоду не переходят.

Антитела к бледной трепонеме IgG

Антитела иммуноглобулины IgG появляются в конце первого месяца (на 4-й неделе) от момента заражения. Их титр выше, чем титр IgM. IgG сохраняются после излечения достаточно длительное время.

Неспецифические антитела

Существует множество серологических реакций. Это объясняется антигенной множественностью бледных трепонем.

В сыворотке крови больного человека на разных стадиях сифилиса кроме специфических образуются те или иные неспецифические антитела - агглютинины, комплементсвязывающие, иммобилизины, антитела, вызывающие иммунную флюоресценцию, преципитины и др.

Серологические реакции по выявлению неспецифических антител обладают относительной специфичностью поэтому, чтобы избежать диагностических ошибок, следует пользоваться не одним, а комплексом серологических реакций (КСР).

Ложноположительные анализы на сифилис

Антитела-реагины, которые вырабатываются в крови человека против кардиолипинового антигена, регистрируются не только при сифилисе, но и при других заболеваниях: коллагенозах, гепатитах, заболеваниях почек, тиреотоксикозе, онкозаболеваниях, при инфекционных заболеваниях (лепра, туберкулез, бруцеллез, малярия, сыпной тиф, скарлатина), при беременности и месячных циклах, при приеме жирной пищи и алкоголя.

Диагностические методики современности дают возможность в условиях лаборатории выявить то или иное заболевание с помощью специальных анализов. К одним из таких стоит отнести иммуноферментный анализ крови, благодаря которому можно подтвердить предварительно поставленный диагноз.

Иммуноферментный анализ ИФА является одним из самых эффективных и современных способов, позволяющих выявить , нарушения, связанные с иммунными и гормональными сбоями, а также онкологические процессы. Во время проведения анализа в крови можно обнаружить антитела, вырабатывающиеся при наличии в организме инфекции. Учитывая этот нюанс, обнаружить болезнь можно даже на самом раннем этапе её развития.

Что лежит в основе методики

В основе результатов ИФА анализа лежит получение химических реакций на ферменты, служащие особенными опознавательными знаками для распознания антител. Следовательно, во время иммунохимических реакций антитела начинают взаимодействовать с некоторыми антигенами. Всё это даёт основания утверждать, что ложные результаты при сдаче крови на ИФА минимальны.

Исследование позволяет определить количество иммунных клеток, их свойства, а также наличие необходимых антител

Положительным результат считается тогда, когда обнаруживается окрашивание раствора. Окрас сигнализирует о том, что антигены взаимодействуют с антителом. В случае когда ничего подобного не происходит, результат является отрицательным.