Ajutor la Tele2, tarife, intrebari

Diagnosticul în timp util al infecției cu HIV devine o măsură extrem de importantă, deoarece inițierea timpurie a tratamentului poate determina în mare măsură dezvoltarea ulterioară a bolii și poate prelungi viața pacientului. În ultimii ani, s-au înregistrat progrese semnificative în identificarea acestei boli groaznice: sistemele de testare mai vechi sunt înlocuite cu altele mai avansate, metodele de examinare devin din ce în ce mai accesibile, iar acuratețea lor crește semnificativ.

În acest articol vom vorbi despre metode moderne de diagnosticare a infecției cu HIV, cunoașterea cărora este utilă pentru tratarea în timp util a acestei probleme și pentru menținerea unei calități normale a vieții pacientului.

Metode de diagnosticare HIV

În Rusia, se efectuează o procedură standard pentru a diagnostica infecția cu HIV, care include două niveluri:

• Sistem de testare ELISA (analiza screening);
• imunoblot (IB).

Pentru diagnosticare pot fi utilizate și alte metode:

• teste rapide.

Sisteme de testare ELISA

În prima etapă a diagnosticului, un test de screening (ELISA) este utilizat pentru a detecta infecția cu HIV, care se bazează pe proteinele HIV create în laboratoare care captează anticorpi specifici produși în organism ca răspuns la infecție. După interacțiunea lor cu reactivii (enzimele) sistemului de testare, culoarea indicatorului se schimbă. În continuare, aceste modificări de culoare sunt procesate cu ajutorul unor echipamente speciale, care determină rezultatul analizei efectuate.

Astfel de teste ELISA pot arăta rezultate în câteva săptămâni de la introducerea infecției cu HIV. Acest test nu determină prezența virusului, ci detectează producția de anticorpi împotriva acestuia. Uneori, în corpul uman, producția de anticorpi împotriva HIV începe după 2 săptămâni de la infectare, dar la majoritatea oamenilor aceștia sunt produși la o dată ulterioară, după 3-6 săptămâni.

Există patru generații de teste ELISA cu sensibilități diferite. În ultimii ani, au fost din ce în ce mai utilizate sisteme de testare de generația a treia și a patra, care se bazează pe peptide sintetice sau proteine ​​recombinate și au o specificitate și o precizie mai mare. Acestea pot fi utilizate pentru a diagnostica infecția cu HIV, pentru a monitoriza prevalența HIV și pentru a asigura siguranța la testarea sângelui donat. Precizia sistemelor de testare ELISA din generațiile III și IV este de 93-99% (testele produse în Europa de Vest sunt mai sensibile - 99%).

Pentru a efectua un test ELISA, se prelevează 5 ml de sânge din vena pacientului. Între ultima masă și analiză trebuie să treacă cel puțin 8 ore (de obicei se face dimineața pe stomacul gol). Se recomandă efectuarea unui astfel de test nu mai devreme de 3 săptămâni de la infecția suspectată (de exemplu, după un contact sexual neprotejat cu un nou partener sexual).

Rezultatele testului ELISA se obțin în 2-10 zile:

• rezultat negativ: indică absența infecției cu HIV și nu necesită contactarea unui specialist;
• rezultat fals negativ: poate fi observat în stadiile incipiente ale infecției (până la 3 săptămâni), în stadiile ulterioare ale SIDA cu suprimarea severă a sistemului imunitar și cu pregătirea necorespunzătoare a sângelui;
• rezultat fals pozitiv: poate fi observat în unele boli și în caz de pregătire necorespunzătoare a sângelui;
• rezultat pozitiv: indică infecția cu HIV, necesită efectuarea unui IB și contactarea pacientului cu un specialist la centrul SIDA.

De ce poate un test ELISA să dea rezultate fals pozitive?

Rezultatele fals pozitive ale testelor HIV ELISA pot apărea din cauza procesării necorespunzătoare a sângelui sau la pacienții cu următoarele afecțiuni și boli:

• mielom multiplu;
• boli infecțioase cauzate de virusul Epstein-Barr;
• stare dupa ;
• boală autoimună;
• pe fundalul sarcinii;
• starea după vaccinare.

Din motivele descrise mai sus, anticorpii nespecifici cu reacție încrucișată pot fi prezenți în sânge, a căror producție nu a fost provocată de infecția cu HIV.

În ultimii ani, frecvența rezultatelor fals pozitive a scăzut semnificativ datorită utilizării sistemelor de testare din generația III și IV, care conțin peptide mai sensibile și proteine ​​recombinante (sunt sintetizate prin inginerie genetică in vitro). După introducerea unor astfel de teste ELISA, frecvența rezultatelor fals pozitive a scăzut semnificativ și este de aproximativ 0,02-0,5%.

Un rezultat fals pozitiv nu înseamnă că persoana este infectată cu HIV. În astfel de cazuri, OMS recomandă efectuarea unui alt test ELISA (neapărat generația IV).

Sângele pacientului este trimis la un laborator de referință sau de arbitraj cu marcajul „repetare” și testat folosind un sistem de testare ELISA de generația IV. Dacă rezultatul noii analize este negativ, atunci primul rezultat este considerat eronat (fals pozitiv) și IS nu este efectuat. Dacă rezultatul este pozitiv sau discutabil în timpul celui de-al doilea test, pacientul trebuie să fie supus IB după 4-6 săptămâni pentru a confirma sau infirma infecția cu HIV.

Blotting imun

Un diagnostic definitiv al infecției cu HIV poate fi pus doar după obținerea unui rezultat pozitiv al imunoblotării (IB). Pentru a-l realiza, se folosește o bandă de nitroceluloză, pe care se aplică proteine ​​virale.

Prelevarea de sânge pentru IB se efectuează dintr-o venă. În continuare, suferă o prelucrare specială, iar proteinele conținute în serul său sunt separate într-un gel special în funcție de sarcina și greutatea moleculară a acestora (manipularea se realizează folosind echipamente speciale sub influența unui câmp electric). Pe gelul de ser sanguin se aplică o bandă de nitroceluloză și se efectuează blotting („blotting”) într-o cameră specială. Banda este procesată și dacă materialele folosite conțin anticorpi împotriva HIV, aceștia se leagă de benzile antigenice de pe IB și apar ca linii.

IB este considerat pozitiv dacă:

• conform criteriilor americane CDC - există două sau trei linii gp41, p24, gp120 / gp160 pe bandă;
• conform criteriilor FDA americane - există două linii p24, p31 și o linie gp41 sau gp120 / gp160 pe bandă.

În 99,9% din cazuri, un rezultat pozitiv IB indică infecția cu HIV.

În absența liniilor - IB este negativ.

La identificarea liniilor cu gp160, gp120 și gp41, IB este îndoielnic. Acest rezultat poate apărea atunci când:

• boli oncologice;
• sarcina;
• transfuzii de sânge frecvente.

În astfel de cazuri, se recomandă repetarea studiului folosind un kit de la o altă companie. Dacă după IB suplimentar rezultatul rămâne îndoielnic, atunci observarea este necesară timp de șase luni (IB se efectuează la fiecare 3 luni).

Reacția polimerazei în lanț

Un test PCR poate detecta ARN-ul virusului. Sensibilitatea sa este destul de mare și permite detectarea infecției cu HIV în 10 zile de la infectare. În unele cazuri, PCR poate da rezultate fals pozitive, deoarece sensibilitatea sa ridicată poate răspunde și la anticorpii la alte infecții.

Această tehnică de diagnosticare este costisitoare și necesită echipamente speciale și specialiști cu înaltă calificare. Aceste motive nu fac posibilă efectuarea de teste în masă a populației.

PCR este utilizată în următoarele cazuri:

• depistarea HIV la nou-născuții născuți din mame infectate cu HIV;
• pentru a detecta HIV în „perioada fereastră” sau în caz de IB îndoielnic;
• pentru a controla concentrația HIV în sânge;
• pentru studiul sângelui donatorului.

Testul PCR singur nu pune un diagnostic de HIV, ci este efectuat ca o metodă suplimentară de diagnosticare pentru a rezolva situațiile controversate.

Metode exprese

Una dintre inovațiile în diagnosticarea HIV sunt testele rapide, ale căror rezultate pot fi evaluate în 10-15 minute. Cele mai eficiente și precise rezultate se obțin cu ajutorul testelor imunocromatografice bazate pe principiul fluxului capilar. Sunt benzi speciale pe care se aplică sânge sau alte fluide de testare (salivă, urină). Dacă sunt prezenți anticorpi împotriva HIV, după 10-15 minute pe test apare o bandă colorată și de control - un rezultat pozitiv. Dacă rezultatul este negativ, apare doar banda de control.

Ca și în cazul testelor ELISA, rezultatele testelor rapide trebuie confirmate prin analiza IB. Numai după aceasta se poate face un diagnostic de infecție cu HIV.

Există kituri de testare rapidă la domiciliu disponibile. Testul OraSure Technologies1 (SUA) este aprobat de FDA, disponibil la ghișeu și poate fi folosit pentru a detecta HIV. După test, dacă rezultatul este pozitiv, pacientului i se recomandă să fie supus unei examinări la un centru specializat pentru confirmarea diagnosticului.

Alte teste pentru uz casnic nu au fost încă aprobate de FDA și rezultatele lor pot fi foarte discutabile.

În ciuda faptului că testele rapide sunt inferioare ca precizie față de testele ELISA de generația IV, acestea sunt utilizate pe scară largă pentru testarea suplimentară a populației.

Puteți face teste pentru depistarea infecției cu HIV la orice clinică, spital central raional sau centre specializate SIDA. Pe teritoriul Rusiei, acestea se desfășoară în mod absolut confidențial sau anonim. Fiecare pacient se poate aștepta să primească consult medical sau psihologic înainte sau după test. Nu va trebui să plătiți decât pentru testele HIV în instituțiile medicale comerciale, în timp ce în clinicile publice și spitalele acestea se efectuează gratuit.

Citiți despre modalitățile prin care vă puteți infecta cu HIV și ce mituri există despre posibilitățile de a vă infecta.

ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA) a intrat în viața medicinei practice undeva în anii 60 ai secolului trecut. Sarcina sa inițială a fost cercetarea histologică în scopuri științifice, care sa rezumat la căutarea și identificarea structurii antigenice a celulelor unui organism viu.

Metoda ELISA se bazează pe interacțiunea antigenelor specifice (AT) și înrudite (AG) cu formarea unui complex „antigen-anticorp”, care este detectat folosind o enzimă. Acest fapt i-a determinat pe oamenii de stiinta sa creada ca metoda poate fi folosita in scopuri de diagnostic pentru a identifica imunoglobuline specifice din diferite clase implicate in raspunsul imun la o anumita infectie. Și a fost o descoperire în diagnosticul clinic de laborator!

Metoda a început să fie utilizată în mod activ abia la începutul anilor 80, iar apoi în principal în instituții specializate. Primele analizoare de imunoenzime au fost dotate cu centre și stații de transfuzie de sânge, spitale de boli infecțioase și de venerologie, de când formidabilul SIDA, născut pe continentul african, a apărut la orizontul nostru și s-a alăturat imediat infecțiilor „vechi”, a necesitat măsuri de diagnosticare imediată și căutare. pentru medicamentele terapeutice care îl afectează.

Domeniul de aplicare al metodei ELISA

Posibilitățile imunotestelor enzimatice sunt cu adevărat extinse. Acum este greu de imaginat cum se poate face fără o astfel de cercetare, care este folosită literalmente în toate ramurile medicinei. Se pare, ce poate face ELISA în oncologie? Se dovedește că se poate. Și multe. Capacitatea analizei de a găsi markeri caracteristici anumitor tipuri de neoplasme maligne stă la baza depistarii precoce a unei tumori, atunci când aceasta nu este încă determinată prin nicio altă metodă din cauza dimensiunilor reduse.

Diagnosticarea clinică modernă de laborator (CDL), pe lângă markerii tumorali, are un arsenal semnificativ de panouri ELISA și le utilizează pentru a diagnostica diferite afecțiuni patologice (procese infecțioase, tulburări hormonale) și pentru a monitoriza medicamentele farmaceutice pentru a identifica efectul acestora asupra organismului pacientului. și, de altfel, nu numai uman. În prezent, imunotestul enzimatic este utilizat pe scară largă în serviciile veterinare, deoarece „frații noștri mai mici” sunt, de asemenea, susceptibili la multe boli, de care suferă uneori foarte mult.

Prin urmare, ELISA, datorită sensibilității și specificității sale, poate determina dintr-o probă de sânge prelevată dintr-o venă:

• Starea hormonală (hormoni tiroidieni și suprarenali, hormoni sexuali);
• Prezența infecțiilor virale și bacteriene (HIV, B și C, chlamydia, sifilis și, precum și multe alte boli cauzate de microorganisme patogene);
• Urme ale activității vitale a microorganismelor care au inițiat procesul infecțios, care s-a încheiat cu succes și a trecut în stadiul formării unui răspuns imun la acest agent patogen. Astfel de urme, adică anticorpii, în multe cazuri rămân în circulație în sânge pentru viață, protejând astfel o persoană de reinfectare.

Care este esența ELISA?

Metoda imunoenzimatică permite determinarea nu numai a prezenței agentului patogen în sine (analiza calitativă), ci și a conținutului său cantitativ în serul sanguin al pacientului.

Doza virală sau bacteriană influențează semnificativ cursul procesului infecțios și rezultatul acestuia, prin urmare analiza cantitativă joacă un rol important în diagnosticarea și tratamentul bolilor în diferite forme și etape.

Cu toate acestea, cunoscând studiile imunologice enzimatice ca metodă ELISA, nici nu ne gândim cum reușește să acopere o gamă atât de largă de microorganisme care locuiesc pe planeta noastră, dintre care multe reprezintă o amenințare directă pentru sănătatea și viața oamenilor și animalelor. Dar adevărul este că ELISA are multe opțiuni (necompetitive și competitive - directe și indirecte), fiecare dintre ele își rezolvă propria problemă și, astfel, permite o căutare țintită.

Pentru a identifica imunoglobulinele dintr-o clasă sau alta, se utilizează un panou (placă) tradițional de polistiren cu 96 de godeuri, în godeurile cărora proteinele recombinante sorbite sunt concentrate în fază solidă. Anticorpii sau antigenii care intră în godeul cu ser de sânge găsesc un obiect „familiar” și formează un complex cu acesta (AG - AT), care, fixat de un conjugat enzimatic, se va manifesta printr-o schimbare a culorii sondei atunci când citind rezultatele.

Imunotestul enzimatic se realizează folosind sisteme de testare cu o anumită specificitate, fabricate în laboratoare speciale și echipate cu toate componentele de reacție necesare. Cercetările se pot desfășura folosind mașini de spălat („săitori”) și spectrofotometre de citire, care implică în mare parte muncă manuală. Pe mașinile complet automate, care eliberează asistentul de laborator de instilarea monotonă, spălare și alte sarcini de rutină, desigur, este mai rapid și mai convenabil să lucrezi, dar nu toate laboratoarele își pot permite un astfel de lux și continuă să lucreze în mod veche - pe mașini semiautomate.

Interpretarea rezultatelor ELISA este de competența medicului diagnosticator de laborator și, de asemenea, trebuie luată în considerare proprietatea inerentă a aproape tuturor reacțiilor imunochimice de a da răspunsuri fals-pozitive sau fals-negative.

Video: imunotestul enzimatic modern

Rezultatele ELISA folosind exemplul sifilisului

Imunotestul enzimatic este potrivit pentru detectarea tuturor formelor, și, în plus, este utilizat în studiile de screening. Pentru efectuarea analizei se folosește sângele venos al pacientului prelevat pe stomacul gol. Lucrarea folosește tablete cu o anumită specificitate (clasele AB A, M, G) sau anticorpi totali.

Având în vedere că anticorpii din sifilis sunt produși într-o anumită secvență, ELISA poate răspunde cu ușurință la întrebarea când a apărut infecția și în ce stadiu se află procesul, iar interpretarea rezultatelor obținute poate fi prezentată în următoarea formă:

• IgM indică durata procesului infecțios (poate apărea în timpul exacerbarii bolilor inflamatorii cronice);
• IgA afirmă că infecția a apărut cu mai bine de o lună în urmă;
• IgG indică faptul că infecția este în plină desfășurare sau că a fost efectuat recent un tratament, care este ușor de determinat prin anamneză.

La testarea pentru sifilis, godeurile negative (și controlul negativ) vor rămâne incolore, în timp ce godeurile pozitive (și controlul pozitiv) vor prezenta o culoare galben strălucitor din cauza schimbării de culoare a cromogenului adăugat în timpul testului. Cu toate acestea, intensitatea culorii nu coincide întotdeauna cu controlul, adică poate fi puțin mai palid sau ușor gălbui. Acestea sunt rezultate dubioase, care, de regulă, sunt supuse reexaminării cu luarea în considerare obligatorie a indicatorilor cantitativi obținuți pe spectrofotometru, dar, în general, culoarea este direct proporțională cu numărul de complexe imune (Ag și AT asociate) .

Cele mai interesante dintre imunotestele enzimatice - ELISA pentru HIV

Analiza este poate mai interesantă decât altele pentru o gamă largă de populație, deoarece este încă imposibil de spus cu încredere că multe probleme sociale au dispărut (prostituția, dependența de droguri etc.). Din nefericire, HIV afectează nu numai aceste straturi ale societății umane; te poți infecta în diferite circumstanțe care nu au legătură cu imoralitatea sexuală sau consumul de droguri. Dar dacă este nevoie de un test HIV, nu trebuie să vă fie teamă că toată lumea din jurul vostru va ști despre vizita dumneavoastră la un astfel de laborator. Acum persoanele infectate cu HIV sunt protejate de lege, iar cei care au dubii pot apela la birouri anonime unde pot rezolva problema fara teama de publicitate si condamnare.

Metoda imunoenzimatică utilizată pentru diagnosticarea infecției cu HIV este unul dintre cele mai importante studii standard, care necesită însă condiții speciale, deoarece tema este foarte delicată.

Este logic să se efectueze ELISA HIV după contact sexual, transfuzie de sânge, alte proceduri medicale care sugerează infecție și la sfârșitul perioadei de incubație („fereastră seronegativă”), dar trebuie reținut că această perioadă de timp nu este constant. Se poate termina în 14-30 de zile, sau poate dura până la șase luni, astfel încât valoarea medie este considerată a fi un interval de la 45 la 90 de zile. Sângele este donat pentru HIV în același mod ca și pentru alte infecții - dintr-o venă pe stomacul gol. Rezultatele vor fi gata în funcție de acumularea de material în laborator și volumul de lucru al acestuia (de la 2 la 10 zile), deși cel mai adesea laboratoarele oferă un răspuns în aceeași zi sau în următoarea.

La ce se poate aștepta de la rezultatele HIV?

ELISA pentru infecția cu HIV detectează anticorpi la două tipuri de virus: HIV-1 (mai frecvent în Rusia și alte țări din Europa și Asia) și HIV-2 (mai frecvent în Africa de Vest).

Sarcina ELISA HIV este de a căuta anticorpi de clasă G, care sunt detectați pe toate sistemele de testare, dar într-o perioadă ulterioară, și anticorpi de clasă A și M, detectați pe truse de testare recombinate de nouă generație, care fac posibilă găsirea de anticorpi. în stadiile incipiente (perioada de incubație - „fereastră seronegativă”). Vă puteți aștepta la următoarele răspunsuri de la ELISA:

1. Rezultat primar pozitiv: sângele trebuie retestat folosind un sistem de testare de același tip, dar dacă este posibil de altă serie și de către o altă persoană (asistent de laborator);
2. Repetarea (+) implică o nouă prelevare de sânge de la pacient cu examinarea acestuia similară analizei primare;
3. Un alt rezultat pozitiv este supus analizei de referință, care utilizează truse de testare foarte specifice (2-3 buc.);
4. Un rezultat pozitiv în ambele (sau trei) sisteme este trimis pentru imunoblotting (același ELISA, dar efectuat individual folosind truse de testare cu specificitate deosebit de ridicată).

Concluzia despre infecția cu HIV se face numai pe baza imunoblotării. O conversație se poartă cu persoana infectată în deplină confidențialitate. Dezvăluirea secretelor medicale în Rusia, precum și în alte țări, este supusă pedepsei penale.

Testele pentru chlamydia și citomegalovirus folosind metoda imunoenzimatică au câștigat, de asemenea, o popularitate deosebită, datorită faptului că fac posibilă determinarea timpului infecției, stadiul bolii și eficacitatea măsurilor de tratament.

În timpul implementării, se poate observa și apariția anticorpilor de diferite clase.în diferite faze ale stării patologice cauzate de un agent infecțios:

• IgM poate fi detectată încă de la șapte zile după infecție;
• IgA indică faptul că infecția trăiește în organism de mai mult de o lună;
• IgG confirmă diagnosticul de chlamydia și ajută la monitorizarea tratamentului și la determinarea eficacității acestuia. Trebuie remarcat faptul că anticorpii de clasa G rămân și circulă în organism, indiferent de durata bolii, prin urmare, pentru a interpreta corect analiza, trebuie să țineți cont de valorile de referință (norme), care, apropo. , sunt diferite pentru fiecare CDL: ținând cont de marca sistemului de testare și de specificul reactivilor incluși în set. Valorile normale sunt introduse în formularul de lângă rezultatul ELISA.

În ceea ce privește, aici este puțin diferit: anticorpii de clasa M apar după aproximativ o lună până la o lună și jumătate, adică rezultatul pozitiv (IgM+) devine în faza infecției primare sau în timpul reactivării unei infecții latente și rămâne astfel de la 4 luni la șase luni.

Prezența anticorpilor de clasa G este caracteristică apariției unei infecții sau reinfecții acute primare. Analiza afirmă că virusul este prezent, dar nu oferă informații despre stadiul în care se află procesul infecțios. Între timp, determinarea titrului normal de IgG provoacă, de asemenea, dificultăți, deoarece depinde în întregime de starea imunitară a unei anumite persoane, care, totuși, se stabilește prin identificarea imunoglobulinelor de clasa G. Având în vedere acest comportament al anticorpilor, la diagnosticarea CMV, este nevoie pentru a evalua capacitatea anticorpilor de clasa G de a interacționa cu CMV, pentru a-l „neutraliza” ulterior (aviditate AT). În stadiul inițial al bolii, IgG se leagă foarte slab de antigenele virale (aviditate scăzută) și abia apoi începe să prezinte activitate, prin urmare, putem vorbi despre o creștere a avidității anticorpilor.

Putem vorbi mult despre avantajele imunotestului enzimatic, deoarece această metodă a reușit să rezolve multe probleme de diagnostic folosind doar sânge venos. Nu este nevoie de lungi așteptări, griji și probleme cu colectarea materialului pentru cercetare. În plus, sistemele de testare pentru ELISA continuă să fie îmbunătățite și nu este departe ziua în care testul va da un rezultat 100% fiabil.

Video: film educațional al Universității Medicale de Stat din Moscova numit după. Sechenov despre elementele de bază ale ELISA

Cel mai răspândit virus în lume astăzi este SIDA, un virus din subfamilia retrovirusurilor; ei mai sunt denumiti și lentivirusuri sau „lenti”. Într-adevăr, în corpul uman încep să manifeste activitate după un timp relativ lung, aproximativ 10 ani.

Există imunodeficiențe de primul și al doilea tip. Dar putem vorbi în siguranță despre extinderea primului tip de virus. Odată ajuns în sânge și alăturându-se celulei responsabile de imunitate, virusul începe să se înmulțească rapid. În timp ce molecula CD4, responsabilă de recunoașterea sa, identifică inamicul insidios, aceasta reușește să infecteze întregul organism. Prin urmare, cu cât este diagnosticat mai devreme, cu atât sunt mai mari șansele pacientului de a primi un tratament în timp util și de a trăi mai mult.

Dacă o persoană are un motiv pentru a se testa pentru SIDA, aceasta ar trebui făcută imediat. Cel mai adesea, baza unui astfel de diagnostic este determinarea anticorpilor împotriva imunodeficienței în sânge - proteine ​​care apar ca reacție la prezența unui virus și încep să se formeze în perioada de la 1,5 la 6 luni de la momentul posibila infectie. În consecință, este mai oportun să se supună diagnosticului după această perioadă.

Cantitatea de anticorpi este determinată folosind un test numit imunotest enzimatic (ELISA). Această metodă este de încredere, este relativ precisă și foarte sensibilă, aceste cifre sunt de peste 99,5%. Piața farmaceutică oferă o serie de truse de diagnosticare pentru ELISA: Combibest HIV, Anti-HIV 1 2, CombiBest anti-HIV, CombiBest anti-HIV 1 2, CombiBest anti-HIV 1 2 d 0172. Aceste sisteme de testare aparțin celui de-al treilea. generaţie. Dezavantajul acestor reactivi este că nu detectează întotdeauna boala devreme. O persoană este deja purtătoare de virus, este potențial periculoasă pentru parteneri, dar anticorpii nu sunt încă prezenți în sânge.

Trusele sunt echipate în principal cu un număr de teste pentru 12*8 sau 192 de teste anti-HIV. Nu este recomandat să le folosiți pe cont propriu. Descrierea medicamentelor afirmă că scopul lor principal este de a detecta cantitatea de anticorpi împotriva ambelor tipuri de SIDA. Și, de asemenea, determinați anticorpi de toate clasele împotriva SIDA. Dacă nu există anticorpi, atunci boala nu a fost diagnosticată.

A patra generație de teste „vede”, în plus față de anticorpi și antigene SIDA, ei sunt capabili să detecteze infecția mai devreme decât mijloacele din a treia generație. Spre comparație: antigenul HIV este în sânge, începând din a 5-a zi, iar primii anticorpi apar nu mai devreme de o lună mai târziu. CombiBest HIV 1, 2 AG/AT (setul 1) și CombiBest HIV 1, 2 AG/AT (setul 2) aparțin testelor de generația a 4-a. Folosind un set de acești reactivi, anticorpii la antigenul de tip 1, 2 și p24 sunt detectați prin examinarea serului sau plasmei din sânge uman. Multe țări folosesc testarea ELISA de a 4-a generație, care se mai numește și Antigen/Anticorp, abreviat AGAT.

Testarea se face anonim.

Deținătorii brevetului RU 2283497:

Invenția se referă la domeniul biotehnologiei și medicinei. Sistemul de testare imunoabsorbant legat de enzime pentru identificarea spectrului de anticorpi la virusul imunodeficienței umane (HIV) de primul și al doilea tip, primul tip de grup O și identificarea antigenului la virusul imunodeficienței umane de primul tip p24 include un imunosorbent bazat pe antigene ale virusului imunodeficienței umane reprezentând gp41 (env HIV-1 și HIV-2 grupa O), gp120 (env), p24 (gag), p31 (pol), gp36 (env HIV-2), anticorpi la antigenul HIV 1 p24 și reactivii de detecție, antigenii HIV de mai sus și anticorpii HIV absorbiți în diferite godeuri ale plăcilor pentru testul imunosorbant legat de enzime și plăci cu 96 de godeuri din polistiren pliabile sau neseparabile sunt utilizate pentru sorbție. Invenția asigură o sensibilitate crescută, simplificare și eliminarea subiectivității în evaluarea rezultatelor. 1 z.p. dosare, 10 tabele, 1 ill.

Invenția se referă la domeniul biotehnologiei și medicinei. Utilizare: detectarea diferențiată a tuturor claselor de anticorpi specifici la proteinele 1 și 2 ale virusului imunodeficienței umane, HIV 1 grup O și antigen HIV 1 p24.

Esență: obținerea unui sistem de testare imunosorbantă legată de enzime pentru identificarea spectrului de anticorpi de toate clasele împotriva proteinelor individuale și HIV 1 și 2, HIV 1 grup O și HIV 1 p24 antigen în serul sanguin (plasmă), imunoglobulinele și produsele din sânge uman în pentru a identifica spectrul de anticorpi la HIV 1 și 2, HIV 1 grup O, detectarea antigenului HIV 1 p24 și confirmarea rezultatelor de screening pozitive sau discutabile pentru anticorpii HIV 1 și 2, HIV 1 grup O și antigen HIV 1 p24.

DESCRIEREA INVENŢIEI

Diagnosticul de laborator al infecției cu HIV se bazează pe trei domenii: a) indicarea HIV și a componentelor acestuia; b) detectarea anticorpilor la HIV; c) determinarea modificărilor sistemului imunitar. Dintre metodele de diagnostic de laborator existente, cele mai frecvente sunt cele serologice - detectarea anticorpilor la antigeni virali.

Pentru a detecta anticorpii în infecția cu HIV, testul imunosorbent legat de enzime (ELISA) și imunoblotting (IB) sunt utilizate în principal. ELISA se bazează pe imobilizarea antigenelor virale pe plăci de care se leagă anticorpii pacientului, iar complexul antigen-anticorp este detectat folosind anticorpi monoclonali de șoarece conjugați cu peroxidază de hrean la imunoglobulinele umane G și M. Metoda este destul de specifică și sensibilă și permite detectarea anticorpilor specifici virusului la 95% dintre pacienți. Restul de 5% din cazuri apar în stadiile incipiente ale infecției, când sunt încă puțini anticorpi în serul sanguin, sau în fazele terminale ale bolii, când organismul nu mai este capabil să sintetizeze anticorpi din cauza unei epuizări accentuate a sistemul imunitar. Rezultatele ELISA fals pozitive sunt, de asemenea, posibile, în principal la pacienții cu boli autoimune și oncologice, precum și în cazurile de infecție cauzată de virusul Eshptain-Barr. În acest caz, o reacție încrucișată a anticorpilor la factorul reumatoid, virusul Epstein-Barr sau la determinanți antigenici similare proteinelor din clasa 1 și 2 a complexului major de histocompatibilitate (HLA-4 și DQW3) și având capacitatea de a se lega de antigenele HIV. apare. Rezultatele fals pozitive sunt frecvente la femeile însărcinate și la vârstnici. Hemoliza, lipemia și contaminarea bacteriană a serului pot provoca, de asemenea, rezultate nesigure.

În acest sens, au fost propuse și utilizate o serie de metode pentru a testa specificitatea rezultatelor detectării anticorpilor. Dintre aceste metode, cea mai frecvent utilizată reacție este „blotting imun” în modificarea „Western Blot”. Esența metodei este următoarea: în prima etapă, proteinele HIV sunt separate în funcție de greutatea moleculară folosind electroforeza pe gel de poliacrilamidă. Transferul electroforetic este apoi efectuat de la gelul de poliacrilamidă la suprafața membranei de nitroceluloză. Antigenii transferați în acest mod sunt detectați pe membrană prin analiză indirectă: membrana este incubată cu materialul de testat; anticorpii conținuti se leagă la antigenele HIV transferate pe o membrană de nitroceluloză, apoi benzile de membrană sunt incubate cu conjugatul; Când se formează un complex antigen-anticorp, conjugatul se atașează de acesta; după spălarea din conjugat și incubarea cu substratul, are loc colorarea în acele zone de nitroceluloză în care a avut loc formarea complexului antigen-anticorp-conjugat. Desenul prezintă exemple de rezultate pozitive, slab pozitive și negative ale imunoblot.

Anticorpii la următoarele proteine ​​(p) și glicoproteine ​​(gp) sunt detectați în serul persoanelor infectate cu HIV-1 și HIV-2: Tabelul A.

Tabelul B prezintă criteriile de evaluare a rezultatelor imunoblotării recomandate de OMS și Centrul Rus pentru Prevenirea și Controlul SIDA.

Pe baza criteriilor OMS, serurile în care sunt detectați anticorpi la oricare două proteine ​​ale anvelopei HIV-1 prin metoda IB sunt considerate pozitive. Dacă există o reacție doar cu una dintre proteinele învelișului (gp160, gp120, gp41) în combinație cu sau fără o reacție cu alte proteine, rezultatul este considerat îndoielnic. Potrivit Centrului Federal Științific și Metodologic al Ministerului Sănătății al Federației Ruse pentru Prevenirea și Controlul SIDA, este posibil să se interpreteze serurile ca pozitive chiar și în prezența anticorpilor la o singură proteină membranară.

Detectarea anticorpilor la antigenul p24 poate indica perioada de debut a seroconversiei, deoarece anticorpii la această proteină apar primii. Reacțiile pozitive cu proteinele gag și pol fără prezența unei reacții cu proteinele env pot reflecta stadiul de seroconversie timpurie și, de asemenea, pot indica prezența infecției HIV-2 sau o reacție nespecifică.

Utilizarea reacției de imunoblotare ca metodă expertă pentru diagnosticarea HIV are o serie de dezavantaje semnificative:

1. Imposibilitatea confirmării depistarii antigenului HIV p24 1 în cazul utilizării testelor care detectează simultan antigenul și anticorpii HIV, ceea ce face inadecvată (fără sens) utilizarea testelor de screening pentru depistarea simultană a antigenului și a anticorpilor HIV ( Ordinul Ministerului Sănătății al Federației Ruse nr. 292 din 30 iulie 2001: „pentru a examina donatorii în stațiile de transfuzie de sânge, este necesar să se utilizeze sisteme de testare care detectează simultan antigenul și anticorpii HIV”).

2. Detectarea numai a anticorpilor din clasa IgG. Este imposibil să se confirme pe deplin rezultatele pozitive obținute folosind teste de generația a 3-a și a 4-a (detectarea anticorpilor IgG și IgM).

3. Subiectivitatea în interpretarea evaluării testului, mai ales în cazurile de rezultate „dubioase” și „incerte” și în stadiile inițiale de seroconversie (benzile detectate pe membranele de nitroceluloză în aceste cazuri sunt neclare, abia vizibile cu ochiul liber, și există adesea dezacord atunci când sunt evaluate de persoane diferite).

4. Imposibilitatea evaluării cantitative automatizate a rezultatelor analizei.

5. Sensibilitate mai mică comparativ cu ELISA.

6. Perioada de valabilitate scurtă (în timpul depozitării, benzile de membrană de nitroceluloză se estompează și nu pot fi o confirmare obiectivă a detectării sau nedetecției HIV în cazuri controversate).

7. Dificultate în stabilirea reacției și depozitare (benzile de membrană de nitroceluloză sunt foarte fragile și se rup adesea).

8. Costul ridicat al truselor de securitate a informațiilor.

Un reactiv cunoscut este un kit pentru determinarea simultană a antigenelor și anticorpilor la același agent patogen, inclusiv HIV (DE 4236189 F1, 28.04.1994). Cu toate acestea, nu este dezvăluit un sistem de testare care permite diagnosticarea infecției cu HIV în diferite stadii.

Obiectivul prezentei invenții este de a obține un sistem de testare prin care să fie posibilă confirmarea rezultatelor pozitive sau îndoielnice ale testelor de screening pentru anticorpi la HIV 1 și 2, HIV 1 grup O și HIV 1 p24 antigen folosind teste pentru detectarea simultană a antigene și anticorpi.

Soluția tehnică propusă este realizată printr-un sistem de testare imunoenzimatică pentru identificarea spectrului de anticorpi împotriva virusului imunodeficienței umane (HIV) de primul și al doilea tip, primul tip de grup O și detectarea antigenului p24 la virusul imunodeficienței umane. de primul tip p24, caracterizat prin aceea că include un imunosorbant pe bază de antigene ale virusului imunodeficienței umane, care sunt gp41 (env HIV-1 și HIV-2 grupa O), gp120 (env), p24 (gag), p31 (pol) , gp36 (env HIV-2), anticorpi la antigenul HIV 1 p24 şi reactivi de detecţie, în care antigenele HIV de mai sus şi anticorpii HIV sunt adsorbiţi în godeuri diferite ale plăcilor pentru imunotestul enzimatic.

În plus, pentru sorbție sunt utilizate plăci de polistiren cu 96 de godeuri pliabile sau nepliabile pentru imunotestul enzimatic.

Rezultatul tehnic obținut prin prezenta invenție este posibilitatea confirmării rezultatelor pozitive pentru anticorpii HIV 1 și 2, HIV 1 grup O și HIV 1 antigen p24, sensibilitate ridicată, posibilitatea interpretării automate a rezultatelor, ceea ce elimină subiectivitatea evaluarea, ușurința efectuării testului, mai puțin decât cu seturile existente de securitate a informațiilor de cost.

Această soluție tehnică diferă de cele cunoscute:

1. Utilizați ca placă purtătoare în fază solidă pentru reacții imunologice.

2. Utilizarea simultană a anticorpilor la p 24 HIV și a unui set de antigene HIV ca absorbant.

Invenţia este ilustrată prin următorul exemplu.

Principiul activ al sistemului de testare dezvoltat „DS-IFA-ANTI-HIV 1,2-SPECTRUM + AG p24 HIV 1” sunt:

Imunosorbent - antigeni recombinanți similari cu proteinele structurale ale HIV-1: gp41 (env HIV-1 și HIV 1 grupa O), gp120 (env), p24 (gag), p31 (pol), HIV-2: gp36 (env) și anticorpi monoclonali de șoarece la antigenul HIV 1(p24), adsorbiți separat pe benzi dintr-o placă pliabilă din polistiren.

Pentru a pregăti utilizarea imunosorbanților:

1. HIV-1 gp41 este o proteină produsă de tulpina E. Coli nr. AHIV 103.

2. HIV-1 gp120 este o proteină produsă de tulpina E. Coli nr. AHIV 109.

3. HIV-1 p24 este o proteină produsă de tulpina E. Coli nr. AHIV 105.

4. HIV-1 p31 este o proteină produsă de tulpina E. Coli nr. AHIV 108.

5. HIV-2 p36 este o proteină produsă de tulpina E. Coli nr. AHIV 106.

Conjugatul 1, liofilizat sau lichid, este un anticorp monoclonal de șoarece la antigenul HIV1 p24 conjugat cu biotină.

1. Conjugatul 2, liofilizat sau lichid, este un amestec de antigene recombinante similare cu proteinele structurale ale HIV-1: gp41 (env HIV-1 si HIV 1 grupa O), gp120 (env), p24 (gag), p31( po1); HIV-2: gp36 (env), conjugat cu biotină;

2. Conjugatele 3, 4 - liofilizate sau lichide - streptavidină, marcate cu peroxidază de hrean;

În timpul studiilor preliminare, a fost selectat proiectarea sistemului de testare, a fost dezvoltată tehnologia de preparare a componentelor acestuia și au fost optimizate condițiile de desfășurare a reacției imunoenzimatice.

La instalarea ELISA în sistemul de testare „DS - ELISA - ANTI-HIV 1,2-SPECTRUM + Ag p24 HIV 1”, se adaugă 25 μl de conjugat-1 în godeurile plăcii cu anticorpi adsorbiți la p24 și în godeurile cu antigene adsorbite - 25 µl de conjugat-2. Schema de reacție este prezentată mai jos. Apoi, în fiecare godeu se adaugă 25 μl de probă de testat. Totodată, în godeurile cu antigeni culoarea se schimbă de la portocaliu la roz, iar în godeul cu anticorpi, de la verde la gri. Amestecul este incubat timp de 45 de minute la 37°C pe un agitator (sau 1 oră la 37°C într-un termostat). Apoi, fără spălare, se adaugă 50 μl de conjugat-3 în godeurile tabletei pentru determinarea antigenului p24 și 50 μl de conjugat-4 se adaugă în godeurile pentru determinarea anticorpilor. După incubare timp de 20 min la 37°C pe un agitator (sau 30 min la 37°C într-un termostat), placa este spălată și dezvoltată cu amestecul de substrat. Timp total de reacție 1 oră 25 minute (sau 1 oră 50 minute). Antigenul p24 prezent în proba de testat se leagă de anticorpi monoclonali la p24, iar anticorpii specifici formează un complex cu antigenii recombinanți de pe placă. Complexul imun rezultat anti-p24 cu p24 este detectat cu conjugați anti-p24-biotină, apoi cu streptavidin-peroxidază, iar complexele imune Ag-HIV cu At-HIV sunt detectate cu conjugat Ag-biotină, apoi cu streptavidin-peroxidază .

Schema de stabilire a reacției.

Contabilitatea rezultatelor se efectuează spectrofotometric la două lungimi de undă: 450/620-680 nm cu instrumentul setat la „aer”. Să luăm în considerare rezultatele la o lungime de undă de 450 nm.

Rezultatele analizei sunt luate în considerare dacă valorile medii ale densității optice (OD) în godeurile cu K- nu sunt mai mari de 0,2, în godeurile cu K+ - nu mai puțin de 1,0. OP crit. calculat prin formula:

OP crit. gp41 = mediu sens OP K-(gp41)+0,15

OP crit. gp120 = mediu sens OP K-(gp120)+0,15

OP crit. p24 = mediu sens OP K-(р24)+0,15

OP crit. p31 = mediu sens OP K-(р31)+0,15

OP crit. gp36 = mediu sens OP K-(gp36)+0,15

OP crit. Ag p24 = medie. sens OP k- (Ag p24)+0,04

unde 0,15 și 0,04 sunt coeficienți stabiliți prin prelucrare statistică la producător. În timpul dezvoltării sistemului de testare au fost utilizate următoarele:

1. Probe de ser de sânge de la donatori sănătoși (n=610).

2. Probe de ser de sânge de la pacienți cu diferite boli infecțioase care nu au legătură cu HIV (infecții respiratorii acute, pneumonie, amigdalite, infecții herpetice și citomegalovirus, sifilis, chlamydia, hepatită virală A, B și C (n=224)).

3. Probe de ser de sânge de la pacienți cu diverse boli neinfecțioase - traumatisme, boli ale sistemului cardiovascular, oncologie (n=35).

4. Probele de ser sanguin de la gravide (n=40).

5. Probele de ser de sânge seropozitive în ELISA și confirmate în imunoblot (n=428).

6. Probe de ser cu rezultat pozitiv obținut în sisteme de testare imunoenzimatică pentru determinarea simultană a anticorpilor HIV 1.2 și a antigenului p24 și rezultat nedeterminat prin imunoblot (n=123).

7. Panoul intern de seruri care conțin și nu conțin anticorpi la HIV 1,2, testate pe sisteme de testare imunoenzimatică și imunoblot înregistrate de Ministerul Sănătății al Federației Ruse (n=21).

8. Standard „STANDARD ANTIGEN HIV 1”, „BIO RAD”, Franța, cat. Nr. 72217, care este un antigen obţinut din lizat viral.

9. Standardul intern al întreprinderii. O probă care conține antigen p 24 la o concentrație de 200 pg/ml, obținută din lizat viral și titrată conform „HIV 1 ANTIGEN STANDARD” companie „BIO RAD”, Franța, cat. Nr. 72217.

10. Panou standard de seruri care conțin anticorpi împotriva virusului imunodeficienței umane tip 1 (HIV 1) - OSO 42-28-212-93-02P, „Medical and Biological Union”, Novosibirsk.

11. Panoul standard de seruri care conțin anticorpi împotriva virusului imunodeficienței umane de tip 2 (HIV 2) - OSO-42-28-216-02P, „Medical and Biological Union”, Novosibirsk.

12. Panoul standard de seruri care nu conțin anticorpi împotriva virusului imunodeficienței umane de tip 1 și 2 (HIV 1, 2) - OSO-42-28-214-94-02P, „Medical and Biological Union”, Novosibirsk.

Sensibilitatea sistemului de testare pentru detectarea antigenului p24 a fost evaluată folosind „STANDARDUL ANTIGEN HIV I”, „BIO RAD” și standardul intern al întreprinderii. Folosind Standardul Intern, s-au preparat 4 diluții în serie de 2 ori de la 40 pg/ml până la 5 pg/ml cu plasmă normală de donor, fără anticorpi HIV 1, 2, ca diluant. Cea mai mică cantitate de antigen detectabil a fost luată ca criteriu de sensibilitate. Datele obținute sunt prezentate în Tabelul 1.

Pentru a evalua sensibilitatea sistemului de testare în detectarea anticorpilor specifici, s-au folosit panouri standard de probe care conțin anticorpi împotriva virusului imunodeficienței umane (HIV 1, 2) (OSO 42-28-212-93-02P p.012, OSO 42-). 28-216- 02P (HIV 2) p.003).

Datele obținute sunt prezentate în tabelele 3, 4.

Eficiența de diagnosticare a sistemului de testare „DS-ELISA-ANTI-HIV 1,2-SPECTR+AGr24 HIV 1” a fost comparată cu sistemele de testare „Jenskrin-HIV-Ag/At” (Bio-Rad), „DIA-HIV 1/2" (Diaprof-Med), "Vironostika HIV Uni-form II Ag/At" (Biomerioux), "Recombinant-HIV1,2 DSM" (MBS), "Amercard Anti-HIV-1,2 K" (Amercard ), „HIV-1, HIV-2-ELISA-Avicenna” (Avicenna). În acest scop, probele de ser din panoul intern au fost testate în toate testele specificate. Rezultatele prezentate în Tabelul 5 indică eficiența diagnostică ridicată a „DS-ELISA-ANTI-HIV 1,2-SPECTRUM+AGr24 HIV 1”.

Studiile de sensibilitate ale sistemului de testare „DS-ELISA-ANTI-HIV 1,2-SPECTRUM+AGr24 HIV 1” au fost efectuate și cu seruri de sânge de la pacienți confirmați prin imunoblotting ca HIV pozitivi. Au fost testate un total de 428 de probe din astfel de seruri. Au fost obținute mai multe opțiuni pentru detectarea anticorpilor la diferite proteine ​​HIV și antigenul p24. Rezultatele sunt prezentate în Tabelul 6.

La testarea probelor HIV 1 pozitive, 3% din seruri au prezentat o reacție pozitivă cu gp36 (HIV 2 env). OP/OPcrit. în aceste probe nu a depăşit 2,0. Datele noastre privind reactivitatea încrucișată a proteinelor exterioare ale HIV 1 (gp41) și HIV 2 (gp36) coincid cu datele din literatură.

Interpretarea rezultatelor

Analiza testării serurilor HIV pozitive și a probelor din panourile standard și interne în „DS-ELISA-ANTI-HIV 1,2-SPECTR+AGr24 HIV 1” ne-a permis să dezvoltăm criterii de interpretare a rezultatelor acestui test. Criteriile recomandate sunt prezentate în Tabelul 7.

Pe baza acestor criterii, toate probele de ser HIV pozitive (n=428) au fost determinate a fi pozitive în „DS-ELISA-ANTI-HIV 1,2-SPECTRUM+AGr24 HIV1”. Din cele 16 probe din panoul standard care conține anticorpi la HIV 1, 14 au fost determinate a fi pozitive și 2 au fost determinate a fi nedeterminate. Toate cele 8 probe din panoul standard care conţin anticorpi la HIV 2 au fost determinate a fi pozitive. Din cele 10 probe din panoul interior care conține anticorpi la HIV 1, 7 au fost determinate a fi pozitive și 3 au fost determinate a fi nedeterminate.

De asemenea, au fost efectuate studii de sensibilitate ale sistemului de testare „DS-ELISA-ANTI-HIV 1,2-SPECTRUM+AGr24 HIV 1” cu seruri de sânge de la pacienți care au avut un rezultat pozitiv la sistemele de testare imunosorbente legate de enzime care detectează simultan anticorpi și antigenul p24 și nedeterminat în imunoblot. Au fost testate un total de 123 de astfel de probe. Datele sunt prezentate în Tabelul 8.

La testarea serurilor cu un rezultat imunoblot nedeterminat (n=123) în „DS-ELISA-ANTI-HIV 1,2-SPECTRUM+AGr24 HIV 1”, 72 de probe (58,5%) au arătat un rezultat pozitiv. Dintre acestea, 26 de seruri (21,1%) au fost pozitive numai pentru p24, 20 (16,3%) - numai pentru anticorpi, 16 (13%) - pentru p24 cu anticorpi la una dintre proteine, 10 (8,1%) - pe p24 cu anticorpi la două sau mai multe dintre proteine. Astfel, testarea numai pentru anticorpi (fără detectarea p24) ar identifica 30 de probe (24,4%) ca fiind pozitive. Detectarea antigenului p24 în test a permis ca încă 42 de probe (34,1%) să fie identificate ca pozitive.

Pentru a evalua specificitatea sistemului de testare, a fost utilizat un panou standard de seruri care nu conțineau anticorpi la HIV 1, 2 (n=20); probe de ser de sânge de la donatori sănătoși (n=610), probe de ser de sânge de la pacienți cu diverse boli infecțioase (n=224) fără legătură cu HIV; probe de ser de sânge de la pacienți cu diverse boli neinfecțioase - traumatisme, boli ale sistemului cardiovascular, oncologie (n=35); probe de ser sanguin de la femei gravide (n=40). Au fost testate un total de 929 de probe. O probă din serurile de sânge ale donatorilor sănătoși a arătat un rezultat fals pozitiv - au fost detectați anticorpi la gp41 și p24. 7 probe de ser de sânge de la donatori sănătoși și 2 probe de ser de sânge de la pacienți cu boli infecțioase care nu au legătură cu HIV au arătat un rezultat fals pozitiv pentru p24.

Pentru a evalua specificitatea sistemului de testare, a fost utilizat un panou standard de probe negative (OSO 42-28-214-94-02p, p. 009). Specificitatea a fost de 100%.

Astfel, studiile au arătat că specificitatea sistemului de testare „DS-ELISA-ANTI-HIV 1,2-SPECTR+AGr24 HIV 1” este de 99% la examinarea probelor de ser sanguin de la donatori normali și de la pacienți cu diferite boli infecțioase și somatice. .

Datele obținute arată eficiența diagnostică ridicată a sistemului de testare dezvoltat „DS-ELISA-ANTI-HIV 1,2-SPECTR+AGr24 HIV 1”. Sistemul de testare poate fi utilizat pentru a detecta anticorpi la proteinele individuale ale HIV tip 1 și 2 și antigenul HIV1 p24 pentru a confirma un rezultat pozitiv al screening-ului cu sisteme de testare care detectează anticorpi sau sisteme de testare care detectează simultan anticorpii și antigenul HIV1 p24. Sistemul de testare poate fi utilizat ca alternativă la testul imunoblot pentru a confirma rezultatele pozitive, precum și pentru a studia dinamica anticorpilor HIV și a antigenului p24 în diferite stadii de infecție.

AVANTAJELE TESTULUI

1. Test de confirmare imunoenzimatică în format tabletă

2. Test de confirmare care combină determinarea spectrului de anticorpi HIV 1, 2 și antigenul HIV 1 p24

3. Detectarea anticorpilor din toate clasele de Ig

4. Sensibilitatea pentru detectarea p24 este de cel puțin 5 pg/ml

5. Reduce rezultatele nedeterminate comparativ cu imunoblot

6. Timp de analiză - 1 oră 25 de minute (imunoblot - de la 3 la 20 de ore)

7. Evaluarea vizuală a adăugării tuturor componentelor și probelor.

1. Un sistem de testare imunoabsorbant legat de enzime pentru identificarea spectrului de anticorpi la virusul imunodeficienței umane (HIV) de primul și al doilea tip, primul tip de grup O și identificarea antigenului p24 la virusul imunodeficienței umane de primul tip p24, caracterizat prin aceea că include un imunosorbant pe bază de antigene ale virusului imunodeficienței umane, reprezentând gp41 (env HIV-1 și HIV-2 grupa O), gp120 (env), p24 (gag), p31 (pol), gp36 (env HIV-1) -2), anticorpi la antigenul HIV 1 p24 și reactivii de detectare, în timp ce antigenele HIV și anticorpii HIV menționați mai sus sunt absorbiți în diferite godeuri ale plăcilor pentru testul imunosorbant legat de enzime.

2. Sistem de testare imunoenzimatică conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că pentru sorbţie se utilizează plăci de polistiren pliabile sau neseparabile cu 96 de godeuri pentru imunotestul enzimatic.