Ajutor la Tele2, tarife, intrebari

Testul Coombs este un test specific de laborator care detectează anticorpii localizați în sau pe suprafața unei celule roșii din sânge. Această procedură face posibilă diagnosticarea sistemului imunitar, inclusiv la nou-născuți, precum și identificarea reacțiilor hemolitice de transfuzie. Testul Coombs este utilizat în mod activ în medicina legală și genetica științifică pentru a determina antigenele eritrocitare. Respectarea tuturor regulilor pentru efectuarea unei astfel de analize vă permite să obțineți cel mai fiabil rezultat.

Scopul testului antiglobulinei

Testul Coombs direct vă permite să detectați anticorpii anti-eritrocitari care sunt fixați pe globulele roșii. O reacție pozitivă într-un astfel de studiu indică dezvoltarea unei boli autoimune. Trebuie remarcat faptul că un rezultat negativ nu exclude prezența anticorpilor, deoarece anticorpii se găsesc adesea în formă liberă, adică nu au nicio legătură cu sângele roșu. celule. În astfel de cazuri, este recomandabil să se efectueze un test Coombs indirect, care va permite determinarea substanțelor autonome în

Cum se face analiza?

Sângele venos este recoltat de la pacient dimineața pe stomacul gol, în ciuda faptului că nu au fost găsiți factori semnificativi care să influențeze rezultatul final al unui astfel de test. Este permisă depozitarea materialului luat la o temperatură de 2 până la 8 °C timp de cel mult șapte zile. Pentru ca rezultatele acestui studiu să fie cât mai exacte posibil, sângele integral trebuie livrat la laborator în primele două ore. În mod ideal, testul Coombs ar trebui să arate un rezultat negativ, care indică absența modificărilor hemolitice în organism.

Decodificarea indicatorilor finali

Testul Coombs este o metodă de cercetare destul de intensă, care necesită o execuție atentă și precisă. Atunci când se utilizează un astfel de test, pot exista unele dificultăți care sunt asociate cu interpretarea incorectă a rezultatelor finale din cauza manifestării slabe a reacțiilor pozitive. Trebuie remarcat faptul că nefiabilitatea analizei - și anume, un test Coombs pozitiv - poate fi o consecință a spălării ineficiente a globulelor roșii, a contactului cu grăsimi.
suprafață, precum și neutralizarea reactivilor antiglobuline de către componente

ser. Un alt dezavantaj al acestei metode de cercetare este instabilitatea materialului luat, a cărui depozitare are anumite caracteristici.

Un rezultat fals negativ poate fi cauzat de agitarea excesivă a suspensiei de globule roșii în timpul resuspensiei. Rezultatele eronate se pot datora și prezenței contaminanților anticorpilor anti-complementari, care sunt adsorbiți în timpul incubației pe suprafața celulelor roșii din sânge testate, rezultând apariția unui rezultat pozitiv. Dacă probele de testat sunt spălate temeinic și condițiile de reacție sunt controlate, aceste neajunsuri pot fi eliminate cu ușurință, ceea ce va crește șansele de a obține cele mai fiabile valori ale testului Coombs.

Testul Coombs este un test de sânge care se face pentru a detecta dacă sângele conține anumiți anticorpi care pot fi nesiguri. Acești anticorpi se lipesc de celulele roșii din sânge și pot invada sistemul imunitar și pot provoca daune în alte moduri. În terminologia medicală, acest studiu este numit și test antiglobulină (AGT).

Tipuri de mostre Coombs

Există două tipuri de teste Coombs - directe și indirecte.

Testul Coombs direct, cunoscut și sub numele de direct (DAT), detectează auto-anticorpi care se atașează la suprafața globulelor roșii. Acești anticorpi sunt uneori produși în organism din cauza anumitor boli sau atunci când iau anumite medicamente, cum ar fi procainamida, metildopa sau chinidina.

Acești anticorpi sunt periculoși, deoarece uneori provoacă anemie prin distrugerea globulelor roșii.

Acest test este uneori comandat pentru a diagnostica cauza icterului sau anemiei.

În mod normal, reacția Coombs este negativă.

Pozitiv pentru:

• boala hemolitică a nou-născuților;
• hemoliză autoimună;
• reacții hemolitice de transfuzie;
• anemie hemolitică imună indusă de medicamente.

Testul Coombs indirect, cunoscut și sub denumirea de , este utilizat pentru a detecta anticorpii la celulele roșii din sânge găsiți în serul sanguin (serul este lichidul galben limpede de sânge care rămâne după eliminarea globulelor roșii și coagulant).

Testul indirect Coombs este utilizat în timpul transfuziei de sânge pentru a determina dacă sângele donatorului se potrivește cu sângele primitorului. Acesta se numește test de compatibilitate și ajută la prevenirea oricărei reacții adverse la sângele donatorului. Acest test este recomandat si femeilor insarcinate. Unele femei au anticorpi IgG, care pot traversa placenta în sângele fetal și pot dăuna nou-născutului, provocând o boală hemolitică cunoscută sub numele de anemie hemolitică.

Procedură

Sângele este extras folosind o seringă dintr-o venă, de obicei din dosul mâinii sau din curba cotului. Înainte de aceasta, locul puncției este dezinfectat temeinic și, după efectuarea unui test de sânge, se aplică tifon curat sau vată.

Sângele rezultat este purificat în laborator și celulele roșii din sânge sunt separate. Proba este apoi testată secvenţial utilizând diferiţi ser şi reactivi Coombs, care sunt contrastaţi. Dacă nu există aglutinare (aglomerarea globulelor roșii), aceasta înseamnă un rezultat pozitiv.

Totuși, dacă testul este negativ, înseamnă că există anticorpi în sânge care acționează împotriva globulelor roșii. Acest lucru poate indica diferite boli, cum ar fi anemia (fie naturală sau cauzată de medicamente), sifilisul sau infecția cu micoplasmă. După primirea rezultatelor, medicul curant va prescrie tratamentul adecvat.

Video

Testul antiglobulinei sau testul Coombs Acest lucru se face pentru a identifica anumiți anticorpi care atacă celulele roșii din sânge (eritrocitele).

Anticorpii sunt proteine ​​produse de sistemul imunitar. De obicei, anticorpii se leagă de substanțe străine, cum ar fi bacteriile și virușii, și le distrug.

Clinica noastra are specialisti specializati in aceasta problema.

(4 specialisti)

2. De ce este necesar un test de anticorpi?

Un test de anticorpi poate fi efectuat în următoarele cazuri:

Înainte de transfuzia de sânge

Probabil știți că o persoană poate avea una dintre cele patru tipuri de sânge. Și se poate face un test antiglobulinic pentru a determina posibilitatea unei transfuzii de sânge. Dacă primiți o transfuzie, sângele donatorului trebuie să se potrivească cu tipul dumneavoastră (să aibă aceleași antigene). Dacă antigenii sunt diferiți în timpul unei transfuzii, sistemul imunitar va distruge celulele transfuzate. Acest lucru poate duce la boli grave și chiar la moarte. Acesta este motivul pentru care este atât de importantă găsirea grupei de sânge potrivite.

Pentru a identifica riscul de sensibilizare Rh

Rhesus este un antigen. Numele său complet este factorul Rh. Testul Coombs este utilizat pentru a detecta anticorpii la factorul Rh din sângele femeilor însărcinate. Dacă o femeie cu sânge Rh negativ este însărcinată cu un copil cu factor Rh pozitiv (se poate transmite de la tată), există riscul de sensibilizare Rh. Sensibilizarea Rh apare atunci când sângele bebelușului se amestecă cu sângele mamei în timpul sarcinii sau al nașterii. Dacă grupa sanguină a mamei este incompatibilă cu grupa sanguină a bebelușului, atunci sistemul ei imunitar poate ataca fătul, percepându-l ca pe un obiect străin. În acest caz, se poate dezvolta o boală gravă numită eritroblastoză fetală. În cazuri rare, dacă boala nu este tratată, fătul sau nou-născutul poate muri.

O femeie cu sânge Rh negativ i se poate administra o injecție cu gamaglobulină anti-Rh (de exemplu, RhoGAM), care este utilizată pentru a preveni dezvoltarea bolii hemolitice Rh.

Pentru diagnosticul anemiei hemolitice autoimune

Anemia hemolitică autoimună este o boală rară asociată cu formarea de anticorpi la auto-antigenele globulelor roșii.

3. Tipuri de test antiglobuline

Există două tipuri de test antiglobulină sau test Coombs: direct și indirect.

Testul Coombs direct sau testul direct cu antiglobulină detectează anticorpii legați de celulele roșii din sânge. Este folosit pentru a determina anemie. În această boală, celulele roșii din sânge sunt distruse mai repede decât sunt produse.

Testul indirect Coombs sau testul indirect cu antiglobulină efectuat pentru a căuta anticorpi care nu sunt asociați cu celulele roșii din sânge. Testul folosește ser de sânge, care conține anticorpi. Această procedură este destul de rară: este efectuată în principal pentru a determina posibilitatea unei transfuzii de sânge sau ca etapă de examinare a femeilor însărcinate.

4. Rezultatele reacției Coombs

Normă:

Rezultat negativ al testului - nu au fost detectați anticorpi.

• Testul Coombs direct. Un test antiglobulină direct negativ înseamnă că sângele dumneavoastră nu are anticorpi asociați cu celulele roșii din sânge.
• Testul Coombs indirect. Un rezultat negativ al testului antiglobulinei indirect înseamnă că sângele dumneavoastră este compatibil cu sângele donatorului. Pentru o femeie însărcinată, acest rezultat înseamnă că organismul ei nu a produs anticorpi împotriva grupului sanguin Rh pozitiv al copilului ei (sensibilizarea Rh nu a apărut).

Abatere de la norma:

• Testul Coombs direct. Un test de antiglobulină direct pozitiv înseamnă că sângele dumneavoastră are anticorpi care luptă împotriva globulelor roșii. Acest lucru poate fi cauzat de transfuzii de sânge incompatibile sau de boli precum anemia hemolitică sau boala hemolitică a nou-născutului (HDN).
• Testul Coombs indirect. Un test de antiglobulină indirect pozitiv înseamnă că sângele dumneavoastră este incompatibil cu sângele donatorului. La o femeie însărcinată, astfel de rezultate înseamnă prezența anticorpilor împotriva factorului Rh pozitiv al sângelui copilului (sensibilizare Rh). Dacă copilul are un factor sanguin Rh pozitiv, mama va fi atent monitorizată de un medic pe toată durata sarcinii.

Principiul antiglobulinei. Anticorpii anti-eritrocitari de tip incomplet si moleculele de complement (C) situate pe suprafata eritrocitelor sunt detectati - test direct - prin aglutinarea lor in contact cu serul animal continand anticorpi la antiglobulina umana (ser antiglobulina). Anticorpii incompleti liberi in ser sunt detectati - un test indirect - prin atasarea acestora la un amestec de globule rosii normale din grupa 0, dintre care toti antigenii apartin sistemului Rh cunoscut, si sunt apoi aglutinati sub influenta serului antiglobulinei.

Materiale, reactivi pentru testul antiglobulinei Coombs: eprubete 10/100 ml; pipete gradate 1, 2 ml; pipete Pasteur; trepiede; lame de sticlă nemăcinate; soluție NaCl 8,5‰; globule rosii. Globulele roșii ale pacientului, precum și cele aparținând grupei 0, vor fi obținute din sânge proaspăt extras folosind un agent anti-coagulare (soluție EDTA).

Globulele roșii din grupa 0 trebuie selectate astfel încât să provină de la indivizi normali și să le conțină pe toate Antigeni Rh. Ele pot fi păstrate până la 7 zile în plasmă autologă la + 4°C. În absența globulelor roșii din grupa 0, se poate folosi un mozaic antigenic cunoscut, un amestec de globule roșii din grupa 0, globule roșii Rh pozitive și Rh negative.

Ser pacientul trebuie să fie proaspăt selectat.

Ser antiglobulinic produs de Institut. Dr. I. Cantacuzino, este disponibil sub forma liofilizata in fiole de 1 ml. După dizolvare, se păstrează serul la -20°C.

Tehnica testului antiglobulinei Coombs:
A) Testul Coombs direct: Clătiți globulele roșii ale pacientului de 3 ori cu soluție de NaCl 8,5‰.
Aplicați o picătură mare de diluții de ser antiglobulină pe mai multe lame de sticlă, iar lângă ea, o picătură mică din sedimentul eritrocitar al pacientului; se amestecă picăturile cu colțul paharului. Lăsați materialul pregătit pe masă timp de 5 minute, apoi examinați prezența aglutinaților. Dacă rezultatul este pozitiv, se determină titrul maxim de aglutinare.

b) Testul Coombs indirect: eritrocite din grupa 0, Rh-pozitiv și Rh-negativ, se clătesc de 3 ori cu soluție de NaCl 8,5‰ și se expun la serul pacientului în proporție de 2 picături de eritrocite la 8-10 picături de ser, apoi se incubează timp de 60 de minute la o temperatura de 37° CU. După aceasta, spălați din nou globulele roșii de trei ori și tratați-le cu ser antiglobulinic, conform instrucțiunilor pentru testul Coombs direct.

Cand vine despre anticorpii activi la rece sensibilizați globulele roșii din grupa 0 timp de 60 de minute. la o temperatură de + 4°C.

Notă 1) Nu efectuați un test Coombs direct pe globulele roșii păstrate timp de una sau mai multe zile la + 4°C sau temperatura camerei, deoarece rezultatele pot fi fals pozitive din cauza fixării anticorpilor incompleti activi la rece prezenți în serul normal. 2) In cazurile de hiperproteinemie severa se spala globulele rosii de 4-5 ori si se verifica absenta proteinelor serice in ultimul lichid de spalare folosind acid sulfosalicilic.

Un posibil reziduu de 2 μg IgG/ml în sedimentul eritrocitar poate neutralizează serul antiglobulinic. Testul Coombs poate fi efectuat și folosind seruri monospecifice anti-IgG, -IgM, -IgA -C3 și -C4 pentru a clarifica tipul de celule situate la suprafața globulelor roșii, de exemplu, la pacienții care suferă de hemolitice autoimune. anemie.

Anemie hemolitică, cauzate de corpurile autoimune care sunt îndreptate împotriva propriilor lor celule roșii din sânge, nu sunt înțelese cu exactitate. Cu toate acestea, se presupune că unii factori (de exemplu, un virus, o proteină anormală) modifică globulele roșii în așa fel încât organismul le percepe „ca ceva străin” și le combate cu ajutorul anticorpilor. Conform unei alte teorii, anticorpii direcționați împotriva celulelor roșii din sânge apar aproape accidental în timpul formării de corpuri proteice plasmatice anormale în unele boli. Astfel de corpuri proteice, la fel de „aleatoriu”, pot da reacții care pot fi folosite pentru a stabili un diagnostic (de exemplu, pneumonia virală, așa cum se știe, dă o reacție Wasserman pozitivă, o reacție Paul-Bunnel pozitivă și o reacție de aglutinare la rece) .

Sunt două principalele tipuri de autoanticorpi pentru anemie hemolitica si anume: anticorpi caldi (reactioneaza la 37°C) si anticorpi reci (a caror reactivitate creste pe masura ce temperatura se apropie de zero). Anticorpii caldi sunt mai frecventi decât anticorpii reci. Dacie a constatat că hemolizinele calde apar de 2 ori mai des decât cele reci. Hemolizinele și aglutininele nu sunt anticorpi fundamental diferiți: diferă doar prin natura acțiunii lor. Aglutininele aglutinează celulele roșii din sânge, iar hemolizinele le fac mai susceptibile la procesul complex de hemoliză (complement!). Autoanticorpii, fixându-se pe eritrocite, formează un complex eritrocit-globină. Acest complex este detectat folosind testul antiglobină Coombs.

Testul Coombs efectuat cu ser Coombs, pentru prepararea căruia iepurele este sensibilizat cu ser uman, împotriva căruia se formează anticorpi în serul de iepure. Când un astfel de ser sensibilizat acționează asupra eritrocitelor umane, aglutinarea acestora are loc dacă receptorii eritrocitari sunt ocupați de anticorpi de blocare. Deoarece acești anticorpi de blocare sunt derivați din ser uman, ei se aglutinează cu ser de iepure sensibilizat la plasma umană și care conține precipitine. Această reacție se numește testul Coombs; pentru anemia hemolitică datorată corpurilor autoimune (Lo tit) este aproape specifică (pentru detalii, vezi Maier).

În general pentru anemiile hemolitice cu o tulburare primară a eritrocitelor, testul Coombs este negativ, iar la cele dobândite este pozitiv. Cu toate acestea, există câteva excepții de la această regulă: un test Coombs fals pozitiv se găsește în timpul crizelor de anemie hemolitică constituțională și într-un grad slab, uneori și după splenectomie, cu artrită reumatică, sarcoidoză, după transfuzii de sânge frecvente și cu lupus sistemic. eritematos. Desigur, în anemia hemolitică dobândită fără formarea de corpuri autoimune, este negativă.

Anemie hemolitică cauzate de corpurile autoimune pot fi împărțite în:
a) formele acute, subacute și cronice, precum și
b) idiopatică cu etiologie necunoscută și c) simptomatică [pneumonie virală (numai aglutinine reci), leucemie limfatică cronică, reticulosarcom, limfosarcom, lupus eritematos sistemic (în principal aglutinine calde, mai rar reci), sifilis (aglutinine reci), cu angajații)).
c) simptomatice [pneumonie virală (numai aglutinine la rece), leucemie limfatică cronică, reticulosarcom, limfosarcom, lupus eritematos sistemic (în principal aglutinine calde, mai rar reci), sifilis (aglutinine reci), tumori ovariene (Miescher și colegii de muncă)).

Clinica de anemie hemolitică, care se dezvoltă sub influența organismelor autoimune, este foarte diversă și, prin urmare, este greu de realizat tabloul clinic general al acestora. Persoanele de toate vârstele și ambele sexe sunt afectate în mod egal. Cu toate acestea, formele idiopatice par să fie mai des observate la femei (Sacks și Workman).

Tabloul clinic al formei idiopatice variază în funcție de severitatea bolii. În cazurile cronice, debutul este gradual, boala se prelungește mulți ani cu exacerbări frecvente. Severitatea anemiei variază în funcție de gradul de hemoliză. Se observă scăderi ale hemoglobinei cu până la 10%; în alte cazuri, hemoglobina rămâne la 50-60% pentru o lungă perioadă de timp. Intensitatea reticulocitozei și a colorării icterice a pielii și a serului corespunde gradului de hemoliză. Bilirubina se găsește foarte rar în urină, deoarece nu trece prin rinichi, dar se observă hemoglobinurie. În cazurile cronice, splina este adesea mărită și poate ajunge chiar la o dimensiune foarte semnificativă, dar în alte cazuri se poate simți totuși. Rareori ficatul nu este mărit.

În sânge în majoritatea cazurilor se observă macrocitoză, în stadiile acute există și multe microcite, normoblastoza și policromazia sunt rareori absente, leucocitoza poate ajunge la 30.000, trombocitele sunt normale. În unele cazuri, totuși, există trombocitopenie severă. Evans explică aceste cazuri prin prezența simultană a anticorpilor împotriva trombocitelor, astfel încât există atât anemie hemolitică, cât și trombocitopenie datorită acțiunii corpurilor autoimune – sindromul Evans. Rezistența osmotică este ușor redusă, dar nu în aceeași măsură și nu la fel de permanent ca în anemia cu celule globulare constituționale. Testul de rezistență la căldură (Hegglin-Maier) după 6 ore poate da, de asemenea, o ușoară hemoliză (observare proprie), dar într-o măsură mai mică decât pentru anemia Marchiafava. Hemosiderina se găsește și în urină (observare proprie).