Ajutor la Tele2, tarife, intrebari

Kira Stoletova

Gastroenterita la porci este o boală complexă cauzată de un virus. Se caracterizează printr-un proces sever putrefactiv (septic), în timpul căruia plămânii și tractul gastrointestinal sunt afectați. Aceste manifestări sunt completate de diateza hemoragică cauzată de complicații ale microflorei (pasteurella, salmonella și alte microorganisme dăunătoare). Pe baza acestor caracteristici, s-a ajuns la concluzia că gastroenterita transmisibilă a porcilor este o boală infecțioasă foarte contagioasă.

Date istorice

TSE a fost descris pentru prima dată la mijlocul anilor 1940 în Statele Unite de către doi cercetători, Hutchings și Doyle.

Apoi, 10 ani mai târziu, a avut loc un focar al bolii în Japonia, Marea Britanie și o serie de țări de pe continentul european, după care gastroenterita virală a porcilor a ajuns în Rusia.

În prezent, boala se manifestă în acele țări în care porcii sunt crescuți activ, astfel încât producătorii încearcă să protejeze animalele de virus cât mai mult posibil. Deoarece provoacă daune economice destul de grave, care se caracterizează prin moartea animalelor, scăderea greutății și costurile financiare alocate pentru tratament și măsuri preventive.

Principalele caracteristici

Agentul cauzal al gastroenteritei transmisibile la porci este un virus care este predispus la formarea de celule sferice; acestea sunt înconjurate de o membrană cu proeminențe mici, care seamănă vizual cu o coroană. Prin urmare, este clasificat ca membru al genului Coronavirus.

Manifestări caracteristice ale bolii:

• diaree severă;
• vărsături severe;
• rata mare de mortalitate în rândul animalelor tinere sub 2 săptămâni.

Agentul patogen rezistă bine la temperaturi scăzute. La minus 17-18°C poate rezista 1,5 ani, dacă temperatura este sub 20°C, atunci un an. Gastroenterita transmisibilă la porci poate fi rezistată la o temperatură de 56°C, iar agentul patogen trebuie menținut în această stare timp de o jumătate de oră.

Sursa agentului cauzal al bolii sunt indivizii infectați, care pot excreta virusul încă 2 luni sau mai mult după ce au fost bolnavi, prin urină, fecale și secreții nazale.

Cea mai mare concentrație se găsește în fecale, așa că EST se transmite destul de repede și afectează intestinele animalelor sănătoase. Boala virală se poate transmite și prin produsele de sacrificare ale persoanelor infectate, prin îmbrăcămintea și încălțămintea muncitorilor, apă, alimente, articole de îngrijire și transportul porcilor.

Dacă gastroenterita transmisibilă virală a porcilor lovește pentru prima dată, atunci după 2-5 zile se răspândește la toți indivizii care au cel puțin o predispoziție minimă la o astfel de boală virală. Unicitatea este că boala apare cel mai adesea în sezonul rece, deși cazurile sunt înregistrate și în alte perioade ale anului. Așa știm momentul în care virusul a apărut în perioadele cele mai fierbinți. De asemenea, riscul de a contracta boala la animale creste in perioadele de ploi abundente. Prin mutație, gastroenterita transmisibilă la porci își întărește poziția și devine o amenințare din ce în ce mai puternică chiar și pentru fermele mari.

Simptomele bolii

Perioada de incubație pentru gastroenterita de porc este de câteva ore. Se întâmplă să continue câteva zile. Inițial, animalele se îmbolnăvesc, încep să vomite, următoarea etapă este diareea. Fecalele au o nuanță verde-gălbui și un miros extrem de neplăcut. La animalele tinere se observă un comportament lent, purceii încep să se înghesuie unul lângă altul, pielea lor este acoperită de transpirație. Pe măsură ce virusul se schimbă și se dezvoltă, diareea devine abundentă. Cu toate acestea, temperatura rămâne normală. Moartea porcilor bolnavi din gastroenterita virală (transmisibilă) are loc la 2-3 zile de la apariția simptomelor principale.

Scroafele care hrănesc purceii în timpul bolii nu au manifestări externe ale dezvoltării EST. Persoanele infectate se confruntă cu diaree, scăderea cantității sau încetarea completă a producției de lapte, stare de depresie și epuizare. Se recuperează rapid, dar secreția de lapte își pierde performanța, iar acest lucru afectează negativ starea generală de sănătate a purceilor. Așa reacționează mult mai puternic animalele tinere la virus, iar dacă nu se iau măsuri, rata mortalității poate ajunge la peste 85%.

Modificări patologice

La cadavrele afectate de gastroenterita transmisibilă se observă o nuanță gri profundă a pielii, emaciare extremă și cianotonicitate. Membrana mucoasă a stomacului este hiperemică, este umplută cu lapte neprelucrat și este ușor dilatată. Pereții intestinali sunt epuizați, partea subțire este umflată și este umplută cu fecale apoase.

În plus, dacă la un porc de fermă apare gastroenterita, apare o inflamație de natură descuamativ-necrotică sau catarală. Umflarea ganglionilor limfatici, hemoragii punctuale la rinichi, o graniță netezită între medular și cortex. Inima devine cenușie și moale. Congestia, care arată ca un atac de cord, se formează în splină.

Cum se pune diagnosticul?

Definirea unei boli se face pe baza caracteristicilor simptomatice furnizate și a rezultatelor testelor de laborator de diagnosticare (aceasta include izolarea agentului patogen pe liniile celulare cu identificarea ulterioară a agentului patogen). Pentru a face acest lucru, intestinul (mic și ileonul) animalului bolnav împreună cu conținutul său este trimis la laborator.

Trebuie luat imediat după apariția simptomelor. Este bine dacă materialul este luat de la mai multe animale: în acest caz rezultatul va fi precis. O boală la un porc este o amenințare reală pentru întregul efectiv și chiar pentru întreaga fermă.

Terapie

Nu există medicamente specifice pentru tratament. Practic, pentru ameliorarea stării, se folosesc Mixoferon, anumite seruri și alte medicamente care reduc detoxifierea în organism, combate manifestările caracteristice deshidratării și ajută la restabilirea funcționării normale a tractului gastrointestinal și în special a intestinelor. Pentru a suprima microflora dăunătoare, medicii veterinari prescriu antibiotice. Scroafelor care alăptează li se administrează medicamente specializate pentru a preveni dezvoltarea agalactiei.

Toate spațiile trebuie dezinfectate. Pentru a face acest lucru, utilizați o soluție de formaldehidă, sodă caustică sau înălbitor. Cadavrele animalelor moarte sunt fie eliminate, fie arse sub supravegherea unui specialist. Gastroenterita la un porc se poate răspândi rapid la întregul efectiv și atunci o epidemie nu poate fi evitată. Dacă gastroenterita este detectată la un porc de fermă, medicii recomandă profilaxia tuturor animalelor tinere, deoarece purceii sunt cei mai expuși riscului de a contracta virusul.

Scroafă s-a îmbolnăvit. Cum să tratezi un porc? Boli ale porcilor. Curtea mea. LPH Mercur

Măsuri preventive

Gastroenterita virală a porcilor este periculoasă pentru animalele tinere fragile. Tratamentul pentru această categorie nu garantează că porcul se va recupera. Pentru a preveni acest lucru, este necesar să se ia măsuri preventive, al căror scop este prevenirea apariției agentului patogen și asigurarea animalelor cu hrană de înaltă calitate.

1. Se creează condiții speciale pentru nou-născuți pentru a evita infecția.
2. Imediat ce un animal este diagnosticat cu HES, ferma declară carantină.
3. Vaccinurile subunitare și atenuate sunt utilizate ca agent profilactic specific pentru scroafe.

Pentru adulți, administrarea medicamentului este posibilă atât intramuscular, cât și oral. Cel mai bine este să vaccinați animalele mici pe cale orală: acest lucru va stimula imunitatea locală și va oferi o protecție mai intensă și de încredere prin efectul său asupra organismului.

Gastroenterita infecțioasă porcină (IGP) (gastroenterita porcină transmisibilă - boala TGP, Doyle și Hitchings) este o boală acută, foarte contagioasă, în principal la purceii cu vârsta de până la 3 luni, manifestată prin vărsături, diaree severă și mortalitate ridicată (de multe ori până la 100). %) la purceii de până la 2 luni.-nu foarte bătrâni.

IGS a fost descris pentru prima dată de Doyle și Hitchings (SUA) în 1946. Virusul gastroenteritei infecțioase porcine (PIGS) a fost izolat și descris pentru prima dată de cercetătorul japonez Tayima (1970). Pe lângă VIGS, coronavirusurile porcine includ și virusul encefalomielitei GA și virusul diareei virale epizootice. Acesta din urmă este oarecum mai ușor. Aparent, grupul de diaree virală epizootică ar trebui să includă virusul KV-777, care provoacă focare masive de diaree la porci de diferite vârste și induce formarea de antigene în citoplasma intestinului subțire și gros. Prin microscopie electronică se găsește în conținutul intestinal și în fecalele purceilor bolnavi. Focare de virus au fost observate în Japonia (1956), Marea Britanie (1957), Canada (1964) și în multe țări europene, inclusiv în țările CSI, 19-54% din fermele de porci din Europa și America de Nord sunt seropozitive pentru THS. . Prevalența în majoritatea țărilor europene este de aproximativ 100%. Această situație este cauzată de o variantă respiratorie a virusului ICV, numită coronavirus respirator porcin (PRCV), care s-a răspândit rapid din 1986. Pierderile economice sunt semnificative. Acestea constau în rata mare de mortalitate a purceilor nou-născuți, eficacitatea scăzută a tratamentului și dificultatea de a preveni introducerea virusului în primăvară, deoarece păsările, în special graurii, joacă un rol semnificativ în acest sens. Eficacitatea vaccinurilor comerciale este foarte limitată.

Simptome și modificări patologice. Virusul afectează purceii cu vârsta de până la 3 luni. La o vârstă mai înaintată, se îmbolnăvesc fără moarte. Scroafele care alăptează bolnave au redus producția de lapte. Boala se manifestă clinic prin lipsa poftei de mâncare, vărsături, diaree (fecale spumoase albicioase, gălbui sau verzui), deshidratare, slăbiciune și mortalitate ridicată. Perioada de incubație pentru purceii de 1-5 zile durează 12-18 ore, toți cei bolnavi mor. La purceii în vârstă de 6-10 zile, perioada de incubație este de 18-36 de ore, iar mortalitatea în rândul lor ajunge la 67%. Pe măsură ce animalele îmbătrânesc, perioada de incubație crește și mortalitatea scade. Sensibilitatea relativ mare la virusul IGS poate fi asociată cu o scădere a citotoxicității limfocitelor față de celulele infectate cu virusul la scroafe în timpul fătării, precum și cu absența citotoxicității limfocitelor la purcei în prima săptămână după naștere. În aceste condiții, purceii pot fi protejați doar prin AT maternă obținută din colostru și lapte. În plus față de enterocite, a căror înfrângere este însoțită de atrofia vilozităților intestinului subțire, macrofagele alveolare, precum și celulele amigdalelor și ale altor organe, pot servi drept celule țintă pentru virus. În celulele amigdalelor purceilor bolnavi, infecția cu HIV a fost detectată chiar mai des decât în ​​celulele jejunului.

Există trei etape ale bolii: preclinic, clinic și de recuperare. În stadiul preclinic, se observă o scădere a apetitului, somnolență, sete crescută și uneori febră (41-41,5 ° C) și vărsături. Perioada clinică se caracterizează prin diaree severă cu eliberare de gaze. Fecalele sunt de culoare gri-roșu sau galben-verde și sunt eliberate spontan. Stadiul de recuperare este mai lung. Purceilor bolnavi le este foarte sete, beau multă apă și sug laptele, care iese nedigerat în fecale lichide. Pierderea de lichid duce la deshidratarea severă a corpului, ducând la acidoză metabolică și alte modificări ale echilibrului electrolitic al sângelui. Moartea este de obicei precedată de comă, care apare în a 3-a zi. La purceii supraviețuitori, regenerarea vilozităților începe după 3-4 zile, iar diareea se oprește. Boala dureaza 2-5 zile, mortalitatea scade pe masura ce varsta purceilor creste.

Factorul de vârstă afectează, de asemenea, durata și severitatea bolii. Scroafele infectate prin contactul cu purceii bolnavi se confruntă cu creșterea temperaturii corpului, pierderea poftei de mâncare, depresie, diaree ușoară și încetarea lactației. Recuperarea are loc în 7-10 zile. Purceii supraviețuitori sunt pipernici. Uneori, encefalomielita cu hiperestezie este asociată cu tulburări gastro-intestinale. De la 43 la 98 % Porcii adulți din diferite țări sunt infectați cu virusul BNA. AT maternă dispare la purcei la 15 săptămâni de viață. Apoi, AT produse în mod activ apar din cauza unei infecții inaparente sub protecția AT materne.

Gastroenterita virală apare în principal în asociere cu infecții bacteriene și mai des cu colibaciloza (37,9%) cauzată de buc. 0-138, 0-103, 0-78, 0-86 și 0-1. Trebuie avut în vedere faptul că RCVS provoacă de obicei o infecție respiratorie subclinica. Febra a fost observată după provocarea intratraheală, în timp ce alți investigatori au observat pneumonie fatală, precum și scădere severă în greutate la purceii de 90 de zile, ceea ce nu a fost observat la porcii de 15 săptămâni.

Modificările patologice la purceii care alăptează care au murit în primele 3 zile de viață sunt observate în principal la nivelul stomacului și intestinului subțire. Există o cantitate mică de colostru coagulat în stomac, membrana sa mucoasă este umflată, roșie și slăbioasă pe alocuri. Modificări similare apar în intestinul subțire. La purceii de 2 săptămâni, modelul autopsiei este mai pronunțat. Cadavrul este slăbit, conjunctiva, mucoasele cavităților nazale și bucale sunt palide, cu o nuanță albăstruie, mușchii scheletici sunt flacci și uscați. Pete roșii-violete apar adesea pe urechi, burtă și gât. Membrana mucoasă a fundului stomacului este puternic hiperemică, umflată, acoperită cu mucus, uneori punctată cu hemoragii punctuale și pe alocuri erodate și ulcerate. Intestinul subțire este distensat cu gaze, umplut cu conținut lichid, în stare de inflamație catarală sau cataral-hemoragică. Membrana mucoasă a intestinului subțire este congestionată sau în stare de inflamație cataral-hemoragică. Ganglionii limfatici mezenteric, portal, renal și gastric sunt umflați, suculenți, splina plină de sânge. Ficatul este palid sau patat, cu o consistenta flasca. Rinichii sunt palizi, uneori cu mici hemoragii sub capsulă. Membrana mucoasă a vezicii urinare este umflată și presărată cu hemoragii. Inima este mărită, miocardul este gri, flasc, subepi - și există mici hemoragii de-a lungul endocardului de-a lungul vaselor. Plămâni fără modificări speciale sau oarecum cu sânge. Membranele creierului sunt hiperemice, substanța creierului este uneori înmuiată, umflată, cu mici hemoragii. La purcei și porcii adulți, modelul de autopsie este similar cu cel de la purceii de 2 săptămâni, dar mai puțin pronunțat.

La purceii care au murit la 1-3 zile după naștere, în stomac și intestinul subțire sunt stabilite degenerarea mucoasă și necroza celulelor epiteliale, pletora și umflarea plăcii de țesut conjunctiv și a stratului submucos al intestinului. La purceii cu vârsta de 2 săptămâni sunt detectate modificări mai profunde. În stomac există pletoră și hemoragii, degenerarea celulelor tegumentare, eroziuni extinse și necroze, înconjurate de infiltrate celulare de leucocite. Este adesea observată gastrita seroasă sau fibrinoasă. În intestinul subțire există hiperemie, hipersecreție, vacuolizare, necroză și descuamare a epiteliului vilos până la expunerea lor completă. Majoritatea vilozităților sunt atrofiate și deformate. Straturile propriu-zise și submucoase sunt hiperemice, edematoase, adesea cu hemoragii, infiltrate cu celule limfoide, eozinofile și plasmatice. În intestinul gros există hiperemie, uneori distrofie și necroză a celulelor epiteliale cripte. Splina și ganglionii limfatici sunt infiltrați cu eritrocite, stroma lor este edematoasă. În ficat există hiperemie, degenerare granulară a hepatocitelor și o încălcare a structurii fasciculului, în rinichi există degenerare granulară a epiteliului canalului, în inimă există modificări în proprietățile tinctoriale ale sarcoplasmei fibrelor musculare, umflarea fibrelor musculare. țesutul conjunctiv intermuscular. În creier, se găsesc „cuplări” limfocitare perivasculare și focare de proliferare glială.

Intrând în organism prin tractul gastrointestinal sau sistemul respirator, virusul pătrunde în epiteliul intestinului subțire. Prin înmulțirea în citoplasmă a celulelor vilozităților membranei mucoase, provoacă degenerare și necroză. Sub influența produselor de descompunere a acestor celule și toxine, apar tulburări hemodinamice și crește permeabilitatea pereților patului microcircular, ceea ce facilitează pătrunderea unei părți a virusului în sânge. Cu toate acestea, cea mai mare parte a virusului este localizată în epiteliul intestinal, provocând degenerarea, necroza și descuamarea celulelor viloase, ceea ce face ca acestea din urmă să se scurteze (atrofie). Cea mai pronunțată necroză celulară și atrofie viloasă sunt observate în partea caudală a duodenului, jejunului și ileonului. Aceste modificări ale celulelor epiteliale sunt cauza perturbării acute a proceselor digestive, dispepsie, diaree și deshidratare și tulburări metabolice. Se notează acidoza, intoxicația generală și moartea animalelor.

Răspândirea virusului IHS în epiteliul intestinal are loc prin eliberarea virusului din celulele infectate în lumenul intestinal și apoi infectarea celulelor din apropiere prin domeniul apical. În cazul infecției cu PCV, nu se observă atrofia papilelor intestinale subțiri. Cu toate acestea, pneumonia interstițială se dezvoltă în plămâni la majoritatea animalelor inoculate.

Morfologie și compoziție chimică. VIGS este asemănător cochiliei, pleomorfă, 60-160 nm în diametru, are un strat de procese în formă de maciucă pe suprafața de proiecție lungă de 12-25 nm. Virusul conține un poliadenilat mare plus ARN (>23 kDa). ARN-ul extras din virioni este infecțios. În timpul procesului de replicare, 5-7 ARNm subgenomici cu capete comune de 3" sunt sintetizate pentru producerea de proteine ​​virale. A fost determinată secvența de nucleotide la capătul de 3" al genomului corespunzătoare ARNm. Densitatea de plutire a virionilor într-un gradient de zaharoză este de 1,18-1,20 g/cm3. Fosfo- și glicolipidele încorporate în înveliș sunt de origine celulară, astfel încât anvelopa virionului este dependentă de celule. VIGS conține trei proteine ​​structurale principale: proteina nucleocapside (N), glicoproteina învelișului mic (M) și glicoproteina peplomer mare (S). În virionul matur, proteina N este „țesută” în ARN viral, formând un complex ribonucleoproteic. Capătul N-terminal heterofil al glicoproteinei M iese din virion și are singurul situs accesibil al glicoproteinei și mediază inducerea CSA și BNA, precum și a interferonului. Glicoproteina S (sau proteina peplomerică) mol. m. 195-220 kD arată ca o coroană de virus pe modele de difracție a electronilor. Este responsabil pentru atașarea virusului la celulă, topirea membranei și inducerea VNA independentă de complement. S-glicoproteina purificată induce formarea de VNA, care neutralizează replicarea virală în toate etapele.

A fost determinată secvența principalelor 8300 de nucleotide de 3" ale ARN-ului genomic al VIGS de la Perdue, adaptate celulelor. Această regiune a genomului conține trei gene structurale principale cu consistență de orientare coronavirus 5" - S - M - N -UȘi patru cadre mari de citire deschise care codifică potențiale proteine ​​virale.

Partea de 5" a genomului codifică o replicază/transcriptază virală ca în virusul IBV. Gradul de omologie a aminoacizilor dintre proteinele structurale ale IBV și coronavirusurile neînrudite antigenic confirmă că aceste coronavirusuri au o origine evolutivă comună. Cu toate acestea, metoda de hibridizarea încrucișată a acidului nucleic printre coronavirusurile neînrudite antigenic nu indică înrudirea observată din cauza unei baze scăzute de secvențe omoloage. Capătul de 3" al ARN-ului genomic PKBC a fost secvențiat recent. Comparația secvențelor de nucleotide și aminoacizi ale PKBC și VIGS dezvăluie 96% omologie. Genomul RKVV conține două hărți diferite: 1 - genei S îi lipsesc 672 de nucleotide în zona de 5", codifică o proteină peplomer mare; 2 - primul cadru de citire deschis din gena S are o dublă ștergere. Această modificare genetică determină alterarea țesutului tropism al RKVV. Aproximativ modificări similare ale fenotipului au fost raportate pentru varianta de placă mică a VIGS. Deși gena S a variantei de placă mică și VIGS sălbatic sunt similare, o deleție mare (462 nucleotide) care provine din gena S are loc în varianta de placă mică. Această ștergere dezvăluie cadrul de citire deschis al unei proteine ​​potențial codificate și porțiunea N-terminală a celei de-a doua proteine ​​​​virale potențiale. stergeri.

Secvența de nucleotide a genei S a virusului peritonitei infecțioase feline (FIPV) a fost determinată și comparată cu cea a genei S a FIV. Pe baza omologiei de nucleotide și aminoacizi, au fost identificate două domenii distincte. Un domeniu (aminoacizii 1–274) a avut o omologie de nucleotide de 39%, în timp ce omologia din domeniul 2 (aminoacizii 275–1447) a fost de 93%. O posibilă explicație pentru aceste divergențe de secvență mare la capătul 31 ar putea fi aceea că HIPC apare prin recombinarea ARN-ARN a VIGS cu virusul asociat. O frecvență ridicată a recombinării ARN-ARN a fost, de asemenea, descrisă pentru coronavirusurile de șoarece.

Virusul este sensibil la eter, cloroform și deoxicolat de sodiu și rezistent la tripsină. Nu este inhibat de inhibitori de ADN. Inactivat cu soluție de formol 0,03%, Lysovet 1% (un amestec de fenol și aldehidă), soluție de p-propiolactonă 0,01%, hipoclorit de sodiu, hidroxid de sodiu, iod. A fost studiată inactivarea termică comparativă a două tulpini ale virusului gastroenteritei infecțioase Perdue și D25. Agentul patogen este rezistent la îngheț. Când este înghețat, materialul care conține virusuri durează 5-8 săptămâni, la -18 °C - până la 18 luni, la -20, -40 sau -80 °C - 365 de zile; când este încălzit la 56 °C, este inactivat în 30 de minute și până la 50 °C în prezența a 1 MgCI2 - în 1 oră; la 37 °C, pierderea completă a infecțiozității a avut loc după 4 zile. Rezistent la pH (4-9). În fecale lichide la soare se inactivează în 6 ore, la umbră - în 3 zile. Amantadina și puromicina inhibă reproducerea virusului. VIGS este stabil în bila purceilor la pH 3,0, menținându-și infecțiozitatea în intestinul subțire.

Structura antigenică. Miezul VIGS este reprezentat de ARN genomic cu o proteină nucleocapsidă (N) legată covalent și fosforilată cu un mol. m. 47 kD. În jurul acesteia se află o proteină lipidică originară din reticulul endoplasmatic al celulelor gazdă, în care sunt localizate lipoproteine ​​specifice virusului de două tipuri: lipoproteina integrală de membrană (M) cu un mol. m. 28 kDa şi glicoproteină peplomerică (S) cu mol. m. 200 kDa, care formează procese de suprafață (peplomeri). În virusul TGS, au fost identificate 4 situsuri Ag (A, B, C și D) și au fost identificați 11 epitopi, dintre care 8 neutralizanți virusul.

Anti-gpS mAbs care neutralizează virusul TGS sunt independenți de complement, în timp ce AT împotriva glicoproteinei M neutralizează și virusul TGS, dar exclusiv în prezența complementului. VNA la proteinele S și M indică heterologitatea antigenului izolatelor de virus TGS. La coronavirusurile porcine și câine, cel puțin un determinant antigen comun a fost găsit în proteina protectoare, care oferă protecție aproape identică purceilor atunci când mamele sunt imunizate cu virusuri homo- și heteroloage. Conform rapoartelor anterioare, virionii TGS conțin următoarele proteine: proteina peplomerică E2 (220 kDa), proteina Ech2 (175 kDa), care este precursorul proteinei E2, proteina de anvelopă cu greutate moleculară mică E1 (29 kDa), nucleoproteina N ( 47 kDa). Serul convalescent conține PA la proteinele S și M, adesea la moli de proteine ​​intracelulare codificate de virus. m. 14 kD. MonAbs au fost obținuți pentru tulpini atenuate și virulente de VTGS și sunt utilizați pentru a caracteriza proteinele virale și a mapa epitopii care detectează AT. Principalii determinanți netralizanti sunt asociați cu glicoproteina S; acești epitopi sunt foarte conservați în majoritatea tulpinilor VIGS.

Antiglicoproteină-M mAb are activitate de neutralizare scăzută sau deloc, dar poate fi crescut semnificativ prin complement. Utilizarea mAb-urilor de neutralizare pentru a determina harta epitopului S-glicoproteinei a arătat prezența a 4-5 situsuri AG diferite care conțin epitopi foarte conservați în situsurile A și B, recunoscuți prin neutralizarea puternică a mAbs.

Variabilitatea antigenică. Tulpinile de virus izolate de la animale din diferite țări sunt identice din punct de vedere serologic, deși în ultimii ani au apărut variante. Există o diferență imunologică între infecția cu HIV intestinală și cea indusă de cultură. Virusul intestinal conține AG A. În 1977 s-a stabilit relația AG dintre VIGS și VPK și același coronavirus canin (CCV). Virusul IHS are un serotip și nu este înrudit cu virusul diareei enzootice porcine sau virusul HA porcin. Coronavirusul respirator porc recent izolat (RSCV/PKBC), care a devenit larg răspândit într-un număr de țări din Europa de Vest, s-a dovedit a fi strâns legat de SIV în termeni de antigen. Principala sa diferență este pneumotropismul excepțional în absența enteropatogenității. În ceea ce privește AG, ambele virusuri sunt similare între ele și au aceiași epitopi neutralizanți în toate proteinele virion (N, S, M). Cu toate acestea, mAb-urile specifice pentru proteina VIGS S recunosc PKBC. Virusul diareei epizootice porcine este un coronavirus tipic în toate proprietățile sale, deși nu are o relație antigenică cu alți membri ai familiei coronavirusului. Gradul de relație dintre VIGS și RCVV a fost studiat în ceea ce privește nivelul de inducere a reacțiilor imune celulare specifice și protecția împotriva infecției provocate la purcei.

VIGS nu este AG înrudit cu alte două coronavirusuri porcine: virusul encefalomielitei HA (PEDV) și virusul diareei epidemice la purcei (CV777). Encefalita cauzată de virusul GA a fost raportată în Europa și Taiwan, iar AT a fost identificată la un număr limitat de porci adulți din Statele Unite. VIGS, KVS și VIPK AG sunt înrudite. Aceste trei virusuri pot reprezenta un număr de mutanți ai tulpinii virale originale. Reacția încrucișată apare și la nivelul proteinelor structurale S, N și M în reacțiile de radioimunoprecipitare, imunoblot și ELISA. Reacții încrucișate similare cu proteinele structurale ale VIGS și PK. VS a fost observată utilizând ser policlonal în imunoblot.

În celulele intestinului subțire ale unui purcel infectat, virusul se înmulțește în 2 săptămâni și este excretat în fecale timp de 7-10 zile după recuperarea clinică. În concentrații destul de mari, se acumulează în epiteliul intestinului subțire, conținutul tractului gastrointestinal și țesutul pulmonar. Virusul care intră în organism cu alimente, datorită rezistenței sale la acid, trece în stomac și se înmulțește în intestinul subțire, distrugând epiteliul vilozităților. Alte celule nu sunt deteriorate. Virusul este localizat în citoplasma celulelor cilindrice ale vilozităților intestinului subțire. Celulele afectate sunt detectate în decurs de 5 ore după infectare. După 9-12 ore, are loc un ciclu repetat al replicării sale, iar după 16-18 ore, un IF specific este notat în majoritatea celulelor. După 24 de ore, apare atrofia vilozității, iar după 3 zile are loc regenerarea celulară, care se finalizează în a 7-a zi.

Porcii bolnavi și recuperați elimină virusul până la 2 luni. Concentrația virusului în excremente este deosebit de mare la debutul bolii și în timpul dezvoltării acesteia (106-107 IDbo/ml). Se găsește în sânge și în organele parenchimatoase în perioada prodromală la prima creștere a temperaturii corpului. Odată cu dezvoltarea viremiei, este detectată în organele parenchimatoase, precum și în membrana mucoasă a nasului, trahee, amigdale și în titruri mai mici - în sânge. La porcii adulți, virusul este rar detectat în organele digestive și respiratorii, precum și în ganglionii limfatici regionali. Nu se reproduce în limfocite. În timpul infecției experimentale a purceilor de 3 zile, în a 2-a zi după inoculare, virusul este izolat din plămâni, ficat, pancreas și sânge. În următoarele 9 zile, titrul său este încă ridicat, dar până în a 15-a zi nu mai este detectat în organe. La purceii de 3 săptămâni, virusul este izolat numai din intestine în 3-5 zile de la infectare. Cu toate acestea, atunci când purceii nou-născuți sunt infectați per os sau intranazal, virusul se reproduce în mucoasa nazală, amigdale și intestinul subțire, apoi se deplasează de-a lungul căilor nervoase către ganglionii periferici și apare în neuronii măduvei spinării și a creierului. La purceii obținuți prin histerectomie de la scroafe infectate experimental în zilele 74 și 95 de gestație s-au depistat localizarea intestinală a virusului și atrofia vilozităților intestinale. Purceii aveau AT la virusul VIGS. Lipsa zincului din alimente agravează boala.

Virusul este excretat din corpul unui animal bolnav în principal în fecale și, într-o măsură mai mică, în urină și excremente. Poate supraviețui în organele interne și ganglionii limfatici ai animalelor convalescente timp de multe luni și ani. Echilibrul virus-gazdă poate fi perturbat de stres. Purceii infectați la vârsta de 5 săptămâni au rămas purtători de virus timp de 104 zile. S-a stabilit că infecția scroafelor gestante cu 2-3 săptămâni înainte de fătare duce la boli răspândite și mortalitate ridicată la purceii lor. Când mătcile sunt infectate cu 1,5-2 luni înainte de fătare, purceii rămân sănătoși pe toată perioada alăptării. După înțărcarea de la mame, se îmbolnăvesc ușor, iar rata mortalității este nesemnificativă. La purceii infectați experimental, purtarea virusului a fost observată timp de 2,5 luni (perioada de observație).

Activitate antigenică. Virusul IGS are activitate antigenă pronunțată și induce sinteza VNA, a cărui activitate se datorează IgA, iar în timpul imunizării - IgG. La porcii infectați per os cu bucăți virulente. A apărut Miller, AT IgA, iar la cei infectați parenteral cu bucăți culturale atenuate. Purdue - IgG. Nucleoproteina virală (N) nu este capabilă să inducă sinteza BHA. În colostru și apoi în laptele scroafelor convalescente, astfel de AT sunt prezente timp de câteva săptămâni.

Purceii de la scroafe care s-au vindecat de boală sau au fost infectați anterior în condiții naturale sunt rezistenți la boală dacă consumă astfel de colostru sau lapte imediat după naștere și cel puțin la fiecare 4 ore. Imunitatea pasivă împotriva infecției intestinale se datorează IgA din lapte. Titrurile AT în colostru și laptele scroafelor infectate sunt mai mari decât în ​​serul sanguin. Niveluri semnificative de IgA sunt detectate în colostru și lapte numai după ce scroafele au mâncat material care conține virus. Un posibil mecanism care explică acest fenomen este acela că imunocitele sensibilizate la Ag din Lamina propria a tractului intestinal populează glanda mamară. Componenta subunitară a VIGS (glicoproteină), atunci când este izolată de virioni prin ultrasunete și separată de componentele virale rămase (folosind centrifugare izopicnică), este capabilă să protejeze purceii atunci când este administrată intramuscular. Animalele vaccinate au dezvoltat un răspuns imun umoral. Principalul mecanism de neutralizare este inhibarea atașării virusului la celulă.

Infecție experimentală. Cauzat de introducerea virusului per os sau intranazal. Cei mai sensibili purcei sunt porcii de lapte cu vârsta cuprinsă între 1 și 15 zile, deși în multe cazuri boala se poate reproduce la animalele adulte. Infecția se realizează ușor numai atunci când materialul este administrat per os. Purceii în vârstă de 1-5 zile pot fi infectați intranazal; Este evident că prin instilarea intranazală a materialului, aproximativ 90% din acesta intră în tractul gastrointestinal. Cu metodele parenterale de infecție, de obicei nu este posibilă reproducerea bolii sau necesită doze de virus de 1000 de ori mai mari decât în ​​cazul infecției orale. Cobai, șoareci albi și șoareci sugari în vârstă de 1-5 zile, iepurii, hamsterii sunt insensibili la VIGS. Infecția purceilor cu VTSE duce la eliberarea rapidă și masivă de interferon-SS (IFN-a) în ser și secreție. Purceii lipsiți de colostru prin operație cezariană au fost infectați oral cu tulpina virulentă Miller de VTGE. Celulele producătoare de IFN-a au fost caracterizate in situ prin imunohistochimie utilizând ser anti-IFN-a porcin de iepure. A fost depistat exclusiv în celulele intestinale și ganglionii limfatici mezenterici, începând la 6 ore după infectare. Vârful a apărut după 12-18 ore Celulele producătoare de IFN au fost localizate între enterocite din intestinul subțire (suprafața epitelială a acestuia), în lamina propria, în jurul plasturilor lui Peyer și, cu frecvență mare, în ganglionii limfatici mezenterici. Splina și ganglionii limfatici poplitei au conținut foarte puține celule producătoare de IFN. Colorarea imunohistochimică dublă a markerilor leucocitari de pe ganglionii limfatici mezenterici în secțiunile lor criogenice a arătat că celulele producătoare de IFN conțin antigen leucocitar de porc de clasa II (SLA) și nu sunt colorate cu anticorpi monoclonali împotriva macrofagelor. Antigenii virali sunt prezenți în ganglionii limfatici mezenterici și sunt asociați cu IFN. A fost detectată expresia complexului major de histocompatibilitate clasa II, care poate rezista celulelor dendritice din mucoasă care sunt capabile să producă IFN după infecția in vitro.

Cultivare. Virusul se înmulțește în culturi primare de celule ale testiculelor, pielii, plămânilor, glandei tiroide, jejunului, ileonului, epiteliului membranei mucoase a cavității nazale și în celulele transplantate ale testiculelor purcelului, fără a provoca CPD în primele pasaje, precum şi în culturile de organe ale esofagului. Rareori izolatele de câmp cauzează distrugerea celulelor în primul pasaj; CPE apare numai după adaptarea preliminară a virusului. Adaptat culturii celulare, se inmulteste rapid si le distruge in 2-4 zile, in functie de doza. Virusul este bine cultivat într-o cultură în suspensie a liniei celulare de rinichi de purcel PPK.-666. Această cultură s-a dovedit a fi un sistem extrem de productiv pentru producția pe scară largă a tulpinii de vaccin SIVIG. Gradul de stimulare a reproducerii coronavirusului bovin de către tripsină variază în funcție de cultura celulară, în timp ce coronavirusul porcin în prezența tripsinei se acumulează într-un titru ridicat (108-109TCD50/yl) în două linii celulare permanente de porc (SPEVi PPS). Titruri maxime de infecțiozitate în timpul cultivării buc. „Pravda”, VGNKI nr. 5 și V-91 într-o cultură monostrat de celule PPS s-au ridicat la 106 TCD50/w, în timp ce la creșterea explantelor fetale intestinale și pulmonare ale unui porc în suspensie au ajuns la 106-5-107-5 și 1O8. °TCD50/ml, respectiv .

Cultura de celule tiroidiene porcine și linia continuă RK-15 sunt cele mai potrivite pentru izolarea virusului. VIGS interferează cu virusul VD-BS și VBA. CPE virală începe cu dezvoltarea unui sincitiu mic sau mare în 24 de ore după inoculare. Ulterior, sincitia mică se îmbină și celulele afectate sunt separate de suprafața sticlei. Un sincitiu mare cu 20-40 de nuclei poate fi observat la infectarea unei culturi de celule din glanda tiroidă a porcilor, în timp ce sincitiul găsit într-o cultură de celule din rinichii porcilor conținea cel mai adesea 2-5 nuclei, rareori mai mulți. Corpii de incluziune nu au fost detectați nici în citoplasmă, nici în nucleu. În cultura de celule renale de porc, IPC este mai puțin pronunțat. Aproape toate izolatele de virus din culturile primare de celule tiroidiene de porc tripsinizate induc formarea de plăci, a căror dimensiune variază de la 1 la 5 mm în diametru. Izolatele proaspăt izolate induc plăci mai mici decât tulpinile de laborator. Plăcile se formează și în linia celulară continuă a testiculelor de porc. Într-o cultură monostrat de celule tiroidiene de porc adulți la pH 6,5, titrul virusului este de 10 ori mai mare decât la pH 7,2 și de 100 de ori mai mare decât la pH 8.

S-au observat diferențe în cultivarea VIGS și KVS in vitro. Ambii virusuri s-au înmulțit în cultură de celule de rinichi canin sau într-o linie continuă de celule de pisică. viruși IPK. iar CVS nu s-a reprodus în celule ST sau în cultura de celule tiroidiene de purcel, în timp ce VIGS a fost izolat în ambele culturi. În macrofagele alveolare s-a reprodus doar VIGS non-virulent adaptat la cultură celulară. VIGS AG este detectat în citoplasma MFA la 4-5 ore după infectare. Virionii maturi apar în înmugurirea citoplasmei din reticulul citoplasmatic și particule virale (65-90 nm în diametru) sunt adesea observate în vacuolele citoplasmatice. Virusul este văzut adiacent membranei celulei gazdă după ce iese din celula infectată. Glicoproteinele virale sunt identificate pe suprafața celulelor testiculare porcine.

A fost stabilită activitatea GA a virusului împotriva eritrocitelor de găină, cobai și bovine. Cu toate acestea, doar virusul propagat în cultura de celule PPS a avut activitate GA, care nu a afectat imunogenitatea. Nu a existat nicio diferență în ceea ce privește inducerea VNA și severitatea imunității protectoare atunci când se utilizează virusuri GA și non-GA. Activitatea GA a coronavirusurilor este asociată cu a patra proteină structurală HE (GAeete-ros). VIGS nu are o glicoproteină NE. Activitatea GA a VIGS depinde de sistemul său de reproducere și este asociată cu glicoproteina peplomerică. Când virusul se înmulțește în linii celulare continue 1BRS și glanda tiroidă a porcilor, virusul aglutinează eritrocitele de cobai în titruri de 1:64 și 1:256.

Activitatea enzimatică este detectată în citoplasma celulelor de porc infectate cu VIGS, care este absentă în cultura celulară normală și nu este detectată în virionii purificați. Activitatea enzimatică necesită ioni de Mg2+.

Surse și căi de transmitere a infecției. Există trei forme de infecție: epizootică, enzootică și infecție cauzată de RCVS, testată serologic ca IGS. Principala sursă de infecție sunt animalele aflate în perioada de incubație, bolnave și recuperate (în decurs de o lună). Infecția se transmite prin furaje, containere, transport, gunoi de grajd și organe. Virusul este izolat din laptele animalelor infectate în timpul fazei acute a bolii. Este detectat în scurgeri nazale în decurs de 10 zile de la infectare. Fecalele animalelor bolnave sunt deosebit de periculoase. Infecția poate fi răspândită de câini și vulpi pe măsură ce virusul se înmulțește în intestine. Virusul poate fi transmis prin muștele de casă (Musca domestica). A fost posibil să-l izoleze din omogenate ale intestinului subțire al muștelor în 104 zile de la infecție și din organele respiratorii - 11 zile. În corpul purceilor infectați experimental de diferite grupe de vârstă, virusul este izolat din intestine, ficat, splină, fecale și plămâni la 12 ore după infectare și persistă până la 20 de zile (perioada de observație). Acest lucru indică faptul că purceii pot fi purtători ai virusului și o sursă de infecție.

Studiile serologice efectuate în Belgia în 1984 au arătat în mod neașteptat o creștere semnificativă a numărului de purtători de AT la VIGS în absența vaccinărilor sau a semnelor clinice de IGS. Un virus non-enteropatogen, un antigen înrudit cu VIGS, s-a dovedit a fi agentul etiologic al acestui fenomen și a fost izolat în cultură celulară. Virusul a infectat celulele epiteliale ale tractului respirator și macrofagele alveolare. În timpul infecției experimentale, doar unele celule neidentificate ale intestinului subțire au fost infectate, iar virusul s-a dovedit a fi limitat sau complet absent în scaun. Purceii au produs AT, care a neutralizat VIGS. Virusul este răspândit în Europa: Belgia, Marea Britanie, Franța, Olanda, Germania, Danemarca și SUA. Infecția cu PCV persistă în fermele închise cu focare epizootice ciclice chiar și pe fondul AT seric pasiv.

În condiții naturale, porcii și câinii sunt sensibili la virus; Purceii nou-născuți sunt de 2-1000 de ori mai sensibili decât porcii care au ajuns în starea de sacrificare. Pierderea poftei de mâncare, diaree, vărsături și hipertermie au fost raportate la câini. Virusul izolat de la câinii bolnavi a fost folosit pentru a infecta purceii de o săptămână. Câinii pot fi purtători ai virusului și o sursă de deținuți pentru porcii susceptibili. CBC, VIGS și VIPK aparțin aceluiași grup de agenți antigenic care diferă de alți membri ai familiei coronavirusului în RN și IF. În condiții naturale, a fost stabilită existența tulpinilor VIGS cu virulență variată. Virușii IGS, IPC și KVS diferă în ceea ce privește patogenitatea pentru purceii nou-născuți. Infecția virulentă cu HIV provoacă aceleași simptome ale bolii ca VIGS. CBC nu provoacă semne clinice ale bolii. Până în prezent, nu au existat rapoarte de infecție naturală a purceilor cu VPK sau KVS. La purceii infectați experimental VIPK Sau KVS, AT la VIGS nu sunt formate.

Imunitatea și prevenirea specifică.În cazul IGS, imunitatea intestinală locală este importantă, deoarece AT umoral nu protejează animalul de infecție. La porcii care și-au revenit după boală, imunitatea durează mai mult de 2 ani. La purcei este slab și de scurtă durată. A fost studiat rolul țesuturilor limfoide respiratorii și intestinale în crearea imunității împotriva VIGS. Este probabil ca apariția IgA după administrarea orală de VIGS să fie de mare importanță în protejarea împotriva acestei infecții. Prevenirea specifică a IHC, în ciuda istoriei sale lungi, rămâne încă o problemă urgentă.

Au fost izolați cinci mutanți HAD HTGE cu defecte în hemaglutinare. Spre deosebire de VTSE parentală, mutanții nu se leagă de mucina porcină, care este bogată în acid sialic. Mutanții au mutații unice punctuale în proteina S (C155F, M195V, R196S, D208N și L209P). Aceste reziduuri de aminoacizi influențează legarea la acidul sialic. Folosind MAbs, s-a demonstrat că patru mutanți HAD au un site antigenic adiacent afectat. Mutanții au rezistență redusă la detergentul oxiglucozid. Acest efect este dependent de sialoglicoconjugate celulare asociate cu virionii. După tratamentul cu neuraminidază, HTGE parental devine la fel de rezistent la oxiglucozidă ca și mutanții HAD. S-a sugerat că capacitatea de a se lega de acidul sialic ajută VTSE să combată substanțele asemănătoare detergentului întâlnite în timpul trecerii prin tractul gastrointestinal și să infecteze epiteliul intestinal.

Cu imunizarea activă, cele secretoare sunt importante)