Agentul cauzal al tularemiei. Tularemia este o infecție deosebit de periculoasă.Precauții în natură

Tularemia este o boală primară a animalelor (de obicei rozătoarelor); la om apare ca o boală infecțioasă acută, cu un tablou clinic variat și cu recuperare lentă. Agentul cauzal al tularemiei - Francisella tularensis - a fost descoperit de G. McCoy și S. Chapin în 1912 în timpul unei epizootii printre veverițe de pământ din zona Lacului Tulare (California), studiată în detaliu de E. Francis, după care a fost numit genul.

Tije polimorfe mici, de 0,2-0,7 µm, cocoide sau elipsoidale, care de foarte multe ori dau o culoare bipolară cu metode speciale de colorare; nemotile, gram-negative, nu formează spori; catalază negativă, formă H2S, aerobi strict, temperatură optimă de creștere 37 °C, pH 6,7-7,2. Tulpinile virulente au o capsulă, formează acid fără gaz în timpul fermentației anumitor carbohidrați (glucoză, maltoză, manoză, fructoză, dextrină), gradul de fermentație variază între diferitele tulpini, conținutul de G+C în ADN este de 33-36% mol. . F. tularensis nu crește pe medii obișnuite. G. McCoy și S. Chapin au folosit mediu de gălbenuș coagulat. Pe el, bacilul tularemie crește sub formă de colonii mici și delicate, care amintesc de picăturile de rouă, apoi cultura capătă caracterul unei învelișuri delicate de șagre, cu o consistență mucoasă slab exprimată. E. Francis a propus un agar nutrient care conține 0,05-0,1% cistină, 1% glucoză și 5-10% sânge pentru creșterea bacilului de tularemie. Pe un astfel de mediu, creșterea este mai luxuriantă și mai grosolană: coloniile sunt rotunde, cu o suprafață netedă, de culoare lăptoasă, umede, cu o consistență slimoasă, înconjurate de un halou verde caracteristic. Creșterea este lentă, dimensiunea maximă a coloniei este atinsă în ziua a 3-5 (1 - 4 mm). Bacteriile tularemie se înmulțesc bine în sacul vitelin al unui embrion de pui, cauzând moartea acestuia în a 3-4-a zi.

Pentru creșterea F. tularensis sunt necesari următorii aminoacizi: arginină, leucină, izoleucină, lizină, metionină, prolină, treonină, histidină, valină, cistină, pentru unele subspecii - serie, tirozină, acid aspartic; in plus, pentru crestere au nevoie si de acid pantotenic, tiamina si ioni de Mg2. Luând în considerare aceste caracteristici, mediile sintetice pot fi folosite pentru cultivarea F. tularensis.

Genul Francisella este clasificat în clasa Gammaproteobacteria, filum Proteobacteria. F. novicida aparține aceluiași gen, a cărui patogenitate pentru oameni nu a fost stabilită.

F. tularensis în forma S (virulentă) are două antigene - O și Vi (antigen capsular). Antigenul O este înrudit cu antigenele Brucella. Disocierea S->SR->R duce la pierderea capsulei, virulența și imunogenitatea. Specia F tularensis este împărțită în trei rase geografice (subspecii):

Holarctic (scăzut patogen pentru iepurii domestici, nu fermentează glicerolul și nu are enzima citrulină ureidază, întâlnită în țările emisferei nordice);

Asia Centrală (scăzut patogen pentru iepuri, are citrulină ureidază și fermentează glicerol);

Nearctic (american), mai patogen pentru iepuri, fermentează glicerolul, are citrulină ureidază.

În plus, tulpinile subspeciilor americane și din Asia Centrală au activitate de fosfatază, care este absentă în tulpinile subspeciei Holarctice.

Rezistența agentului cauzal al tularemiei

F. tularensis este destul de stabilă în mediul extern, mai ales dacă este conținută în material patologic. În furaje și cereale contaminate cu secreții de rozătoare bolnave, supraviețuiește până la 4 luni; în apă - până la 3 luni; în gheață - mai mult de 1 lună. Sensibil la lumina directă a soarelui (moare în 30 de minute), temperatură ridicată (la 60 ° C, moare în 10 minute), sub influența unei soluții de 3% Lysol, 50% alcool, formaldehidă și alte antiseptice, moare în 5-10 minute.

Epidemiologia tularemiei

Principalul rezervor al tularemiei în natură este rozătoarele, printre care epizootiile sunt observate în condiții naturale. Este infectat doar de la animale; agentul patogen nu se transmite de la o persoană la alta. Agentul patogen a fost găsit la 82 de specii de rozătoare și lagomorfe, cel mai adesea întâlnite la reprezentanții a 4 familii: asemănător șoarecelui (Muridae), asemănător iepurelui (Leporidae), sciuridae (Sciuridae) și jerboa (Dipodidae). Pe teritoriul Rusiei, principalii purtători sunt rozătoarele asemănătoare șoarecilor: șobolani de apă, șobolani obișnuiți, șoareci de casă și șobolani.

Pe baza sensibilității la tularemie, animalele pot fi împărțite în patru grupuri:

Grupa 1 - cei mai sensibili (voare, șobolani de apă, șoareci de casă, șoareci albi, cobai și alții). Doza minimă letală este o celulă microbiană;

Grupa 2 - mai puțin sensibile (șobolani cenușii, gophers etc.). Doza minimă letală este de 1 miliard de celule microbiene, dar o celulă microbiană este suficientă pentru a infecta unele dintre ele;

A 3-a grupă (prădători - pisici, vulpi, dihori). Rezistenta la dozele infectioase mari, boala apare fara manifestari vizibile;

Grupa 4 - imun la tularemie (ungulate, animale cu sânge rece, păsări).

Pentru oameni, doza minimă infecțioasă este o celulă microbiană. Infecția umană are loc în toate căile posibile: contact direct și indirect cu rozătoarele bolnave, cadavrele acestora sau obiectele contaminate cu rozătoare; nutriționale (prin consumul de alimente și apă infectate cu rozătoare), praf în aer și transmitere. Infecția cu bacterii tularemie a fost stabilită la 77 de specii de artropode care suge sânge. Sunt deosebit de importante căpușele Ixodid, în care agentul patogen persistă de-a lungul vieții și chiar este transmis transovarian la descendenți. Aceste circumstanțe contribuie la înrădăcinarea bolii în natură. Infecția unei persoane cu căpușe nu are loc printr-o mușcătură, ci ca urmare a contactului agentului patogen cu pielea împreună cu fecalele de căpușă.

Pe teritoriul Rusiei, există 7 tipuri principale de peisaj de focare naturale de tularemie: mlaștină, luncă, stepă, pădure, pârâu de la poalele dealului, tundra și tugai (deșert).

Simptomele tularemiei

Agentul cauzal al tularemiei intră în organism prin tegumentul exterior (piele și membranele mucoase deteriorate și nedeteriorate). Ulcerele se formează adesea la locul injectării. Prin vasele limfatice, bacteriile intră în ganglionul limfatic regional și se înmulțesc acolo nestingherite; procesul inflamator duce la formarea unui bubon. De aici agentul patogen pătrunde în sânge, bacteriemia determină generalizarea procesului, diferite organe și țesuturi sunt implicate în acesta, proliferarea bacteriilor în care duce la formarea de granuloame și ulcere necrotice. Restructurarea alergică a organismului este asociată cu bacteriemie și generalizare. Perioada de incubație a tularemiei variază de la 2 la 8 zile. Boala începe acut: apar febră, dureri de cap, dureri musculare și înroșirea feței. Cursul ulterioar depinde de localizarea porții de intrare, conform căreia se disting următoarele forme clinice de tularemie: ulcerativ-glandular (bubonic), oculoglandular, angino-glandular, abdominal și pulmonar. Rata mortalității pentru tularemie nu depășește 1-2%.

Postinfecțios este durabil, persistent, în cele mai multe cazuri de-a lungul vieții, are natură celulară, este cauzat în principal de limfocite T și macrofage și, într-o măsură mai mică, de anticorpi. Fagocitoza la indivizii cu este completă.

Diagnosticul tularemiei

Toate metodele microbiologice sunt folosite pentru a diagnostica tularemia. Cercetarea se desfășoară în laboratoare securizate. Materialul pentru cercetare - sânge, punctat dintr-un bubon, răzuire dintr-un ulcer, secreție conjunctivală, placă din faringe, spută etc. - este determinat de forma clinică a bolii. În plus, puteți lua apă și produse alimentare pentru testare. În focarele naturale de tularemie, sunt efectuate studii sistematice planificate pentru a izola agentul cauzal al tularemiei de la rozătoare.

Metoda bacteriologică de diagnosticare a tularemiei la om dă rareori rezultate pozitive. O cultură pură este de obicei izolată după acumulare pe animale de laborator sensibile. Pentru biotestele se folosesc șoarecii albi și cobai. Soarecii sunt infectati subcutanat, cobai - intraperitoneal; animalele mor în a 3-a-6-a zi, uneori după îngheț. Animalele infectate sunt ținute în condiții speciale (ca la diagnosticarea ciumei) și observate timp de 6-14 zile. Gelurile, animalele de experiment nu mor timp de 7-15 zile, sunt ucise în a 15-20-a zi și cadavrele sunt deschise. În prezența tularemiei, sunt detectate modificări patologice și anatomice sub forma unui proces productiv cu necroză. O cultură pură este izolată din organele interne pe un mediu de gălbenuș, un focar de sânge de glucoză-cisteină etc. Identificarea se bazează pe morfologia și proprietățile tinctoriale ale agentului patogen, lipsa creșterii pe MPA și aglutinarea cu ser omolog. patogenitate pentru șoarecii albi și cobai. O cultură pură poate fi izolată prin infectarea embrionilor de pui de 12 zile și a sacului vitelin. Pentru a izola o cultură pură a agentului patogen din apă, acesta este centrifugat sau filtrat prin filtre bacteriene, iar sedimentul este folosit pentru a infecta animalele de laborator. Când se studiază produsele alimentare, acestea sunt spălate cu MP B, centrifugate, iar animalele de laborator sunt infectate cu sedimentul.

Concomitent cu examenul bacteriologic, din materialul studiat se prepară frotiuri de amprentă și se colorează conform Romanovsky-Giemsa. În frotiurile din organe pot fi găsite bacterii mici cocoide și în formă de tijă, care sunt localizate intracelular și sub formă de ciorchini, formând o capsulă delicată.

Pentru diagnostic, se utilizează o reacție de aglutinare detaliată, RPGA și RIF.

Testele alergice sunt utilizate pentru diagnosticarea precoce a tularemiei (din a 5-a zi de la debutul bolii). Se folosesc două tipuri de tularină și, în consecință, două metode de administrare a acestora: cutanată și intradermică. Deoarece concentrația de alergen în ambele tipuri de tularină este diferită, este inacceptabilă utilizarea tularinei cutanate pentru un test intradermic și invers. Rezultatele unei reacții alergice sunt luate în considerare în timp după 24, 36, 48 de ore.Un infiltrat cu un diametru de cel puțin 5 mm este luat ca rezultat pozitiv. La persoanele care au fost vaccinate sau s-au recuperat de la tularemie, testele alergice rămân pozitive un număr de ani (reacție anamnestică).

Prevenirea specifică a tularemiei

Pentru prevenirea specifică se folosește o vaccinare împotriva tularemiei, obținută în 1930 de medicii militari interni B.Ya. Elbert și N.A. Gaisky din tulpina Me 15. Vaccinul oferă imunitate de durată timp de 5-6 ani atunci când este infectat cu subspeciile europene și holarctice și este eficient împotriva varietății americane a agentului patogen. Vaccinarea se efectuează conform indicațiilor epidemiologice, precum și persoanelor aparținând grupelor de risc. Este permisă vaccinarea simultană împotriva tularemiei și brucelozei; tularemie și ciuma și împotriva tularemiei și a altor infecții.

Prevenirea nespecifică a tularemiei este aceeași ca și pentru alte zoonoze și vizează în primul rând combaterea rozătoarelor.

"

Definiție - boală infecțioasă bacteriană focală naturală zoonotică cu un mecanism de transmitere a agentului patogen transmis prin vector. Se caracterizează prin intoxicație generală, febră, leziuni ale ganglionilor limfatici, tractului respirator și tegument extern (în funcție de mecanismul de transmitere a agentului patogen).

Agent patogen - tijă polimorfă nemobilă gram-negativă mică Francisella tularensis din familia Brucellaceae din genul Francisella. Conține antigene somptic (O) și anvelope (Vi); acesta din urmă este asociat cu virulența microbilor. Afinitatea antigenică cu Brucella provoacă reacții încrucișate. Există 2 tipuri de microbi: unul mai patogen de tip A (biovar F.t.tularensis), a cărui existență în natură se menține datorită ciclului iepuri de câmp - căpușe, și unul mai puțin patogen de tip B (biovar F.t.palaearctica), care circulă în lanț de rozătoare - țânțari.

Un anaerob facultativ, reproducerea necesită introducerea de cisteină, ser de iepure defibrinat și alți stimulenți de creștere în mediul nutritiv. Pe medii dense formează mici colonii albicioase.

Microbul nu este rezistent la temperaturi ridicate (la 60° C moare în 5-10 minute, la 100° C - timp de 1-2 minute), dar la o temperatură de 0-4° C rămâne în apă și sol timp de 4 până la 9 luni; în cereale și furaje la 0° C supraviețuiește până la 6 luni, la 8-12° C - până la 2 luni, la 20-30° C - până la 3 săptămâni; în pielea rozătoarelor care au murit de tularemie la 8° C rămâne viabil până la 1 lună, la 30° De la - până la 1 săptămână. Microbul nu este rezistent la uscare, razele ultraviolete sau dezinfectanți: soluțiile de Lysol, cloramină și înălbitor îl ucid în 3-5 minute.

Rezervor și surse de agent patogen: numeroase specii de rozătoare, insectivore și prădători, dar principalele specii care asigură existența agentului patogen în natură sunt șobolanii obișnuiți, șobolanii de apă, șobolanii muschi, iepurii de câmp și hamsterii, de la care se infectează rozătoarele sinantropice asemănătoare șoarecilor. Rezervorul agentului patogen este, de asemenea, multe tipuri de căpușe (în special căpușe ixodid), țânțari și căpușe. O persoană bolnavă nu prezintă un pericol epidemiologic.

Tularemia se referă la boli infecțioase focale naturale, adică agentul patogen este capabil să circule în focar printre animale fără a participa la lanțul de transmitere pe termen nelimitat. Pe teritoriul fostei URSS, pe baza caracteristicilor peisajului, au fost identificate următoarele tipuri de focare naturale de tularemie: luncă-mlaștină, luncă-câmp, pădure, stepă (pârâu), pârâu la poală, tugai și tundra. . Fiecare tip de focar are propriile sale caracteristici epizootice și epidemiologice.

Perioada de infectare a sursei. Rozătoarele infectate rețin agentul patogen în fluxul sanguin în timpul etapei de septicemie și până la moartea lor din cauza acestei infecții; insecte suge de sânge - timp de 2 săptămâni; căpușe - pe viață.

Mecanismul de transmitere a agentului patogen. Agentul cauzal al tularemiei este transmis la om prin mecanisme transmisibile, de contact, orale și de aspirație. Mecanismul de transmitere se realizeaza prin capuse infectate, tantari, cali; contact - ca urmare a pătrunderii agentului patogen prin leziuni ale pielii la mușcarea rozătoarelor infectate, jupuirea acestora, tăierea carcaselor etc.; orală - prin apă și alimente contaminate cu secreții de rozătoare; aspirație - prin pulbere în aer, adică prin inhalarea prafului contaminat cu un agent patogen.

Sensibilitatea naturală a oamenilor foarte inalt. Boala transferată formează de obicei imunitate pe tot parcursul vieții.

Semne epidemiologice de bază. Tularemia este frecventă în Europa (Austria, Rusia, Franța, Germania, Suedia), Asia (Japonia) și America de Nord. O creștere a morbidității umane se observă în anii de creștere a numărului de rozătoare.Există cazuri sporadice și focare epidemice, care se caracterizează de obicei prin predominarea uneia dintre căile de transmitere a patogenului. Boala afectează în principal locuitorii din mediul rural care se infectează în condiții domestice (de obicei prin consumul de apă sau alimente contaminate cu agentul patogen) sau industriale (infecții profesionale, adică la treieratul pâinii contaminate de rozătoare, sortarea legumelor, transportul paielor, precum și în timpul vânătorii). , pescuit, unde există riscul de infecție prin vector). Sunt cunoscute și infecțiile de laborator cu tularemie.

Perioadă incubație de la 1 zi la 3 săptămâni, de obicei 3-7 zile.

Principalele semne clinice: debut acut. Temperatura corpului crește la 38-39° De aici incolo are un caracter neregulat, persistand 2-3 saptamani. Apar frisoane, o durere de cap ascuțită, dureri musculare și uneori greață și vărsături. Fața și conjunctiva sunt hiperemice. Ficatul și splina sunt mărite. Forma clinică a bolii este determinată în mare măsură de transmiterea agentului patogen, adică de poarta de intrare a acestuia: infecțiile transmisibile și de contact sunt însoțite de dezvoltarea formelor bubonice (mărirea diverșilor ganglioni limfatici) sau ulcerativ-bubonice; apa si caile alimentare duc la forma angino-bubonica sau intestinala (abdominala); infecția prin aspirație presupune dezvoltarea unei forme pulmonare, cu afectare a bronhiilor sau plămânilor. Această opțiune se caracterizează printr-un curs lung și sever. Cu o infecție masivă, precum și la persoanele slăbite, este posibilă o formă septică primară sau generalizată. Mortalitatea nu depăşeşte 0,5% şi se observă numai în forme generalizate, pulmonare şi abdominale.

Diagnosticul de laborator. Se folosesc reacții serologice (RSK, ELISA, RA, RPGA) și testul alergic cutanat. La diagnosticarea RA, o suspensie de bacterii tularemie ucise cu formaldehidă este utilizată ca antigen. Un titru de 1:100 sau mai mare este considerat diagnostic. RPGA este de obicei pozitiv din a 2-a săptămână. Răspunsul în a 3-5-a zi de la debutul bolii este pozitiv atunci când se utilizează un test de alergie intradermică. Eșantionul este specific. Tularin se injectează intradermic într-o doză de 0,1 ml în treimea medie a antebrațului. Reacția se înregistrează după 24-48 ore.Se consideră pozitivă în prezența roșeață și infiltrare.

Pentru a izola agentul patogen, se folosește un test biologic pe șoareci albi. Această metodă examinează organele animalelor, artropodele, organismele acvatice, apa, diferite substraturi de mediu și materialul uman. Animalele mor din cauza tularemiei în a 3-4-a zi, mai rar - mai târziu. De la animalele de biotest moarte, frotiurile de amprentă sunt prelevate din organe și culturile sunt prelevate pe mediu gălbenuș.

Observarea dispensară a bolnavului efectuat pe o perioadă de 6-12 luni. în cazurile de efecte reziduale după o boală. Examinările sunt efectuate de un medic KIZ și de un chirurg lunar în prima jumătate a anului și, dacă este necesar, o dată la 2 luni. în viitor.

Agentul cauzal al tularemiei a fost izolat pentru prima dată în 1911 de către McCoy și Chapin în timp ce studiau boala veverițelor de pământ în SUA (California, județul Tulare). În 1921, cercetătorul american E. Francis a aflat că această boală este și caracteristică oamenilor și a descris-o. Prin urmare, agentul patogen a fost numit Francisella tularensis.

Morfologie. Agenții cauzali ai tularemiei sunt cocobacterii mici. Dimensiunea lor medie este de 0,3-0,6 × 0,1-0,2 microni. Sunt foarte polimorfe: forme sferice, filamentoase și alte forme se găsesc în frotiuri. Există culturi care trec prin filtre bacteriene. Bacteriile tularemia sunt imobile și nu formează spori. Au o capsulă delicată și sunt gram-negative. În frotiurile de amprentă realizate din organe și colorate conform Romanovsky, bacteriile au o culoare violet moale.

Cultivare. Agenții cauzali ai tularemiei sunt anaerobii facultativi. Ele cresc pe medii bogate în nutrienți: mediu coagulat de gălbenuș, agar carne sau mediu de pește cu adaos de cistină, glucoză și sânge. Se reproduc mai bine pe medii nutritive solide, dar creșterea poate avea loc și pe medii lichide și semi-lichide. Pe medii nutritive solide, bacteriile tularemia cresc lent, 4-14 zile la o temperatură de 36-37 ° C și pH 6,8-7,2. Formează colonii mici, albicioase, convexe, strălucitoare, cu margini netede, cu un diametru de 1-3 mm. Tulpini virulente în formă S. Tulpini de vaccin în formă SR. Forma R a bacteriilor este avirulentă (în timpul cultivării pe termen lung în condiții de laborator, se transformă în forma R).

Proprietăți enzimatice. În bacteriile tularemie, proprietățile enzimatice sunt slab exprimate și sunt detectate numai pe medii speciale. Pot fermenta glucoza, maltoza, manoza, levuloza cu formarea de acid fara gaz. Unele tulpini descompun glicerolul și uneori produc hidrogen sulfurat.

Formarea toxinelor. Nu a fost detectată nicio exotoxină în bacteriile tularemie. Efectul patogen al microbilor este aparent asociat cu endotoxina.

Structura antigenică. Forma S a bacteriilor tularemie conține două complexe antigenice: antigene O și Vi. Virulența și imunogenitatea sunt asociate cu antigenul Vi. Formele R pierd antigenul Vi. O-antigenul are un antigen comun cu bacteriile brucelozei.

Rezistența la factorii de mediu. La o temperatură de 100°C, bacteriile tularemia mor instantaneu, la o temperatură de 60°C persistă 20 de minute. La temperaturi scăzute și în solul umed, agenții patogeni persistă până la 4-5 luni. La 1°C în apă, acestea rezistă până la 9 luni, cerealele și paiele la 0°C - până la 150 de zile, pâinea - până la 14 zile, carnea - până la 30 de zile etc. Soluțiile convenționale de dezinfectanți îi omoară în 10 - 15 minute. Bacteriile tularemia sunt sensibile la multe antibiotice.

Susceptibilitatea animalelor. Agenții cauzali ai tularemiei sunt patogeni pentru multe specii de animale. Infecția naturală cu tularemie este cunoscută la 145 de specii de vertebrate și la peste 100 de specii de animale nevertebrate. Multe specii de rozătoare și unele insectivore sunt cele mai susceptibile la tularemie.

Dintre animalele de experiment, cobai și șoarecii albi sunt sensibili.

Surse de infecție- rozătoare, în principal șobolani de apă, șobolani, șoareci de casă, șobolani, hamsteri și iepuri de câmp. Sursa de infecție poate fi apa, alimentele, paiele și alte substraturi contaminate cu secreții ale animalelor bolnave.

Căile de transmisie. Transmisibil, aer-praf, alimente, contact și casnic.

Patogeneza. Bacteriile tularemia sunt foarte invazive. Ele pătrund prin pielea și membranele mucoase deteriorate și nedeteriorate.

În funcție de calea de intrare în organism, agenții patogeni pot fi localizați în piele, mucoase ale tractului intestinal, tractului respirator, ochi și alte organe. De la poarta de intrare se deplasează prin canalele limfatice până la cei mai apropiați ganglioni limfatici, unde se înmulțesc și intră în sânge. În zonele de acumulare a agenților patogeni de tularemie se formează granuloame specifice de tularemie - buboi primari. Odată cu răspândirea în continuare a microbilor, pot apărea buboni secundari. Dimensiunile buboilor variază de la o alune de pădure la un ou de găină.

Se disting următoarele forme clinice ale bolii: bubonic, angino-bubonic, oculobubonic, pulmonar, abdominal și generalizat. În funcție de severitatea cursului - forme ușoare și severe. În funcție de durata cursului - forme acute și prelungite.

Imunitate. Intens și lung. Determinată de factori umorali și celulari. Caracteristica tularemiei este o afecțiune alergică care apare încă din primele zile ale bolii.

Prevenirea. Controlul rozătoarelor și insectelor. Măsuri sanitare generale.

Prevenirea specifică. Ei imunizează oamenii care trăiesc în zonele cu focare naturale. Imunizarea se realizează cu vaccinul viu Gaisky-Elbert. Vaccinați o dată, pe cale cutanată. Durata imunității este de 3-6 ani.

Tratament. Bacteriile tularemia sunt sensibile la multe antibiotice: streptomicina, biomicină, tetraciclină, monomicină, kanamicina. Nu sunt sensibili la penicilină și sulfonamide.

Întrebări de control

1. Care sunt caracteristicile morfologice și culturale ale agenților cauzali ai tularemiei?

2. Structura antigenică. Care antigen este asociat cu virulența și care formă, S sau R, este mai virulentă?

3. Care este rezistența bacteriilor tularemie în mediul extern?

4. Ce animale sunt susceptibile la tularemie? Principalele surse de infecție.

5. Poarta de intrare a infectiei. Patogeneza. Principalele forme ale bolii.

6. Prevenirea specifică.

Examen microbiologic

Scopul studiului: identificarea agentului cauzal al tularemiei.

Colectarea și cercetarea materialelor se desfășoară în condiții strict controlate.!

Material pentru cercetare

1. Conținutul bubonului (forme bubonice, ulcerative-bubonice și angino-bubonice).

2. Descărcări din membrana mucoasă a ochilor (forma oculobubonică).

3. Sputa (forma pulmonară).

4. Mișcările intestinale (forma abdominală).

5. Sânge (forma generalizată).

În laboratoare speciale se examinează rozătoarele și secrețiile acestora, artropodele (căpușe, purici, țânțari, calai), apa, produsele alimentare etc.

Metode de colectare a materialului

Tularemia este o boală acută infecțioasă focală naturală care afectează ganglionii limfatici, organele parenchimatoase, pielea, uneori ochii, faringele, plămânii și este însoțită de intoxicație severă. Boala se găsește predominant în peisajele zonei cu climă temperată din emisfera nordică.

Principalul rezervor și sursă de infecție pentru tularemie sunt numeroase specii de rozătoare sălbatice, lagomorfe etc. Rolul principal în menținerea infecției în natură revine rozătoarelor (șobolan de apă, șobolan, șobolan etc.). O persoană bolnavă nu este periculoasă pentru ceilalți.

Mecanismul de transmitere a bolii este multiplu, cel mai adesea transmisibil. Agentul patogen persistă în natură în ciclul căpușă-animal și este transmis la animalele de fermă și la păsări prin căpușe și insecte suge de sânge. Vectorii specifici ai tularemiei sunt căpușele ixodide. O persoană se infectează cu tularemie ca urmare a contactului direct cu animalele (jupuirea, colectarea rozătoarelor moarte etc.), precum și pe calea nutrițională prin alimente și apă infectate cu rozătoare. Infecția apare adesea prin intermediul vectorilor suge de sânge (căpușe, țânțari, purici, calarei și alte artropode). Infecția este posibilă și prin aspirație (prin inhalarea prafului infectat din cereale, paie și legume). Cazuri de boli umane au fost înregistrate în industriile asociate cu prelucrarea materiilor prime naturale (zahăr, amidon, fabrici de alcool, lifturi etc.), în uzinele de procesare a cărnii, precum și la sacrificarea oilor și bovinelor care aveau căpușe infectate.

Căi de infecție: contact (prin piele și membrana mucoasă a ochilor), transmisibil (prin mușcătura unui purtător), nutrițional (prin tractul gastrointestinal), aspirație (prin tractul respirator).

Agentul cauzal al tularemiei aparține subclasei γ a protoprotobacteriilor, familiei Francisellaceae, familie Francisella, care include două tipuri: F. tularensisȘi F. filomiragia.

În cadrul unei specii F. tularensis Există 4 subspecii: F. tularensis subsp. tularensis sau nearctica- Nearctic, F. tularensis subsp. holarctica– Holarctic, F. tularensis subsp. mediasiatica - Asia Centrală și F. tularensis subsp. novicida. Subspecie holarctica include trei opțiuni biologice: japonica- Biovar japonez, biovar I Ery(S)(sensibil la eritromicină) și biovar II Ery(R)(rezistent la eritromicină).

Diferențierea intraspecifică a agentului cauzal al tularemiei se bazează pe diferențele dintre subspecii și biovaruri în funcție de o serie de caracteristici fenotipice: activitatea biochimică, gradul de patogenitate pentru oameni și animale, sensibilitatea la anumite antibiotice și pe ecologia agentului patogen și a habitatului său. . La nivel genotipic, subspeciile se disting prin VNTR - analiza genomului. Găsit pe teritoriul Rusiei F. tularensis subspecie holarctica cu două biovarii – I Ery(S)și II Ery(R), a cărui circulație se realizează în principal printre rozătoare și lagomorfe. Ele se pot răspândi și prin căpușe ixodid și corpuri de apă.

Agentul cauzal al tularemiei F.tularensisîn frotiurile unei culturi vechi de 1-2 zile crescute pe medii nutritive solide, constă din celule cocoide cu un diametru de 0,3-0,5 µm. În frotiurile preparate din culturi de medii nutritive lichide, microbul tularemiei are forma unor tije scurte. În țesuturile animalelor care au murit din cauza tularemiei, agentul patogen se găsește sub formă de cocobacterii. Când sunt cultivate pentru o lungă perioadă de timp pe medii nutritive, bacteriile de tularemie prezintă un polimorfism semnificativ: există atât celule mai mari, sferice, cu diametrul de până la 3 microni, cât și cele mici, de până la 0,1–0,2 microni.

Bacteriile tularemia sunt imobile, gram-negative, dar colorează mai palide cu coloranții anilină decât alte bacterii gram-negative, se reproduc prin înmugurire, nu formează spori și secretă o substanță mucoasă asemănătoare capsulei. Consistența mucoasă a culturii este evidențiată în frotiuri colorate și atunci când masa bacteriană este emulsionată într-o picătură de soluție salină (cultura este trasă în buclă). În frotiurile colorate cu Gram, mucusul abundent se găsește sub forma unei ochiuri subțiri continue de culoare roz.

Bacteriile tularemie sunt anaerobe facultative. Temperatura optimă pentru cultivarea lor este de 36-38 ºС; la temperaturi mai scăzute, reproducerea are loc mai lent, iar sub 20 ºС se oprește. Concentrația optimă de ioni de hidrogen în medii pentru creșterea microbilor tularemiei este de 6,8-7,3. Agentul cauzal al tularemiei nu crește pe mediile nutritive convenționale - MPA și MPB (excepție - F. tularensis subsp. novicida), dar necesită pentru cultivare medii care conțin sânge, gălbenuș de ou sau înlocuitori ai acestora. Aceasta este baza pentru diagnosticul diferențial al microbilor tularemiei. Din medii nutritive solide utilizate pentru creștere F. tularensis, cel mai comun este mediul de gălbenuș coagulat McCoy. Cultura microbului tularemiei crește pe ea sub forma unui înveliș mucos sinuos, strălucitor, delicat, aproape incolor, care poate fi îndepărtat cu ușurință cu o buclă. Suprafața de însămânțare constă din multe colonii mici fuzionate, care amintesc de „piele de șagreen”. Creșterea sub formă de colonii individuale are loc numai atunci când sunt inoculate din organe animale cu un conținut scăzut de bacterii tularemie și apare la o dată ulterioară (în zilele 9-12).

Împreună cu mediul de gălbenuș pliat al lui McCoy, mediul sanguin Emelyanova, FT-agar și mediile preparate pe bază de agar uscat pentru creșterea microbilor tularemiei, inclusiv cele cu adaos de antibiotice, sunt folosite pentru a crește patogenul tularemiei.

Cultura în formă S pe mediul sanguin Emelyanova crește sub formă de colonii omogene albicioase rotunde, uniform convexe, netede, ușor strălucitoare, cu margini netede, până la 1-2 mm în diametru. Bacteriile care formează colonii în forma S sunt foarte virulente pentru animalele de laborator; coloniile de tulpini slab virulente (forma SR) au dimensiuni mai mari. Culturile avirulente cresc sub forma R și sunt aglutinate de tripaflavină. Bacteriile tularemia fermentează slab doar câțiva carbohidrați și alcooli până la acid pe medii speciale. Hiss media nu este potrivită pentru asta. Capacitatea de fermentare a diferitelor subspecii ale microbilor tularemiei nu este aceeași (Tabelul 17).

Tabelul 17

Caracteristică F. tularensis(pe subspecii) și F. filomiragia

Semn Subspecie Francisella tularensis Francisella philomiragia
tularensis holarctica media-siatica novicida
Dimensiune, microni < 0,5 < 0,5 < 0,5 < 1,5 < 1,5
Disponibilitatea capsulei + + + N / A
Proprietăți tinctoriale Gr - Gr - Gr - Gr - Gr -
Mobilitate
Creștere pe medii standard + (–) +
Creștere pe medii cu cisteină + + +
Creștere în bulion nutritiv, 0% NaCl
Creștere în bulion nutritiv, 6% NaCl +(–) +(–)
Temperatura optimă de cultivare, o C 25 sau 37
Formarea H2S pe un mediu cu cisteină + + + + +
Formarea H2S pe medii standard +
Formarea indolului +
Formarea ureazei
Reducerea nitraților
activitatea β-lactamazei + + + +
Fermentare la acid: maltoză lactoză zaharoză D-glucoză glicerol + – – + + + – – + – – – – – + + (–) – + + + (–) + – + + (–) –
Producția de citriullinureidază + + + N / A
Producția de indofenoloxidază +
Produse Catalase + + + + +
Activitate proteolitică +
Aglutinabilitate cu ser antitularemie + + + +(–)
Mol% G+C ADN 33–36 33–36 33–36 33–34
% omologie a genei ARNr 16 S cu F. tularensis ATCC 6223 ≥99,8 ≥99,8 ≥99,8 ≥99,8 ≥98,3
Prezența genei lpn, care codifică sinteza unei proteine ​​cu o greutate moleculară de 17 kD + + + + +
DL50 pentru iepuri, m.k. < 101 > 106 > 106 > 106 N / A
Doza minimă infecțioasă pentru șoareci, m.c. < 103 < 103 < 103 N / A
Zona de distribuție Doar în America de Nord În emisfera nordică, excluzând Anglia, Islanda și Portugalia Zona inundabilă a râurilor Chu și Ili (Kazahstan) și delta râului Amu Darya (Uzbekistan). America de Nord, cazuri izolate în Australia și Thailanda Teritoriul Americii de Nord

Notă: n/a – fără date, +(–) – caracteristica este caracteristică majorității tulpinilor izolate.

Lipopolizaharida microbului tularemiei este principalul antigen imunodominant și ținta răspunsului anticorp specific al macroorganismului la agentul patogen. Diagnosticul serologic al tularemiei la om și animale se bazează pe detectarea anticorpilor specifici de tularemie împotriva epitopilor LPS. Structura și specificitatea antigenului LPS bacterian F. tularensis trei subspecii principale (cu excepția F. tularensis subsp. novicida) este identică. Spre deosebire de endotoxinele clasice, preparatele LPS ale agentului cauzal al tularemiei se caracterizează prin inerție biologică - sunt inductori slabi ai citokinelor și nu sunt toxice pentru animalele de laborator. Nu a fost detectată nicio exotoxină în bacteriile tularemie. Subspecia este foarte patogenă pentru oameni tularensis, subspecie holarcticaȘi mediasiatica moderat patogen.

Genomul microbului tularemiei este reprezentat de un cromozom, a cărui dimensiune este de aproximativ 1830 kb. Majoritatea membrilor familiei Francisellaceae proprii fagi și plasmide nu au fost detectate. Singura excepție este F.

tularensis subsp. novicida, în care a fost identificată o plasmidă criptică mică pFN. Pentru a detecta ADN-ul agentului cauzal al tularemiei în materialul studiat, se utilizează o metodă genetică moleculară - reacția în lanț a polimerazei (PCR). PCR se bazează pe identificarea secvențelor de nucleotide din genomul agentului patogen care determină factorii de patogenitate F. tularensis. Motivul pentru patogenitatea ridicată a microbilor tularemie nu a fost pe deplin determinat. Sunt considerați posibili factori de virulență: lipopolizaharidă (LPS), o proteină de 23 kD, enzime pentru biosinteza purinelor și peptidoglicanilor, proteaza Clp de șoc termic, proteinele de patogenitate Pdp, proteinele reglatoare MglA și MglB. Toate sunt importante pentru persistența agentului patogen în macrofage - o etapă importantă în dezvoltarea procesului infecțios. Cu toate acestea, cele mai specifice dintre genele studiate sunt fopA, responsabil de sinteza membranei exterioare și igl ABCD operon care codifică sinteza proteinelor cu dimensiunea de 23 kD. Au un grad ridicat de similitudine în toate subspeciile microbilor tularemiei și pe baza lor se realizează sinteza primerilor specifici genului de tularemie pentru PCR.

Variabilitatea genetică a subspeciilor și a tulpinilor individuale ale microbului tularemiei este asociată cu prezența regiunilor de diferențiere RD, repetiții variabile în tandem (VNTR) și polimorfism cu un singur nucleotide (SNP). Tastarea VNTR și SNP F. tularensis permite diferențierea între subspecii și între tulpini și stabilește originea geografică a agentului patogen.

Agentul cauzal al tularemiei are proprietăți alergene pronunțate. Efectul alergenic este caracteristic atât bacteriilor tularemie vii, cât și ucise, cu diferite grade de virulență. Pe această proprietate F. tularensis A fost fondată o metodă alergică pentru diagnosticarea tularemiei la om. Microbul tularemiei este patogen pentru multe specii de animale și oameni. Printre animalele de laborator, șoarecii albi și cobaii prezintă o sensibilitate ridicată la tularemie. Când sunt infectați subcutanat cu material infectat, șoarecii albi mor în medie în 3-4 zile, iar la autopsie se constată că au: hiperemie severă și umflarea vaselor țesutului subcutanat; infiltrat inflamator la locul injectării materialului; mărirea, hiperemia și întărirea ganglionilor limfatici regionali, ficatului, splinei; hiperemia peretilor intestinali.

Cobaii care sunt infectați subcutanat cu material infectat mor în 6-9 zile. Modificările patologice ale organelor unui cobai la moartea infecției cu tularemie sunt bine exprimate. La autopsie se constată că au: hiperemie și umflarea vaselor țesutului subcutanat, infiltrat inflamator cu hemoragii și zone de necroză la locul injectării materialului; o creștere bruscă, hiperemie și compactare a ganglionilor limfatici regionali, ficatului, splinei. Nodulii necrotici cenușii („splină de sago”) sunt clar vizibili la suprafața și în profunzimea țesutului splinei și ficatului. În cavitatea abdominală se acumulează exudatul seros-hemoragic.

LECȚII PRACTICE

Agentul cauzal al tularemiei este Francisella - bacterii polimorfe foarte mici. Inclus în departament Cracilicutes, secțiunea 4 (Coci și bastonașe aerobe gram-negative). Gen Francisella prezentat în două tipuri, unul dintre ele este Francisella tularensis – patogen. Această specie provoacă o boală infecțioasă focală naturală a animalelor - tularemie - caracterizată prin febră, paralizie la animalele tinere, ganglioni limfatici măriți și avort.

Bacteria tularemie a fost izolată în 1912 de McCoy și Chapin în timp ce studiau o boală asemănătoare ciumei la veverițele de pământ din județul Tulare (California). Gen Francisella numit după Francis, care a studiat pentru prima dată biologia acestui microb. Într-o vedere F. tularensis Există trei rase geografice: Holarctica, Asia Centrală și Nearctica, care diferă în unele caracteristici biologice.

Morfologie. ÎNÎn frotiurile colorate, agentul cauzal al tularemiei are o formă de cocoid sau în formă de tijă, 0,3-0,7 µm în lungime și 0,2-0,4 µm în lățime; există celule mai mici (0,15 µm sau mai puțin) care pot trece prin filtrele bacteriene. Formele cocoide se găsesc mai des în culturi, cele în formă de tijă - la animale. Bacteria se caracterizează prin polimorfism, care se dezvăluie în timpul creșterii pe medii nutritive: în preparatele din culturi, împreună cu bacteriile tipice, pot fi găsite forme sferice și filamentoase.

Microbul este imobil, nu formează spori și are o capsulă mică; în culturi produce mucus, care este ușor de detectat la realizarea frotiurilor.

Agentul patogen este colorat cu toți coloranții de anilină, dar este vizibil mai palid decât alte bacterii și este gram negativ. În frotiuri-amprente din organele animalelor moarte, se colorează bine conform Romanovsky-Giemsa, dobândind o culoare liliac. În țesuturi, bacteriile nu se colorează bipolar, motiv pentru care diferă de Pasteurella.

Cultivare. Bacteria nu crește pe medii nutritive universale. Pentru cultivarea lui, se folosește mediu de gălbenuș McCoy pliat (60% gălbenuș de ou de găină și 40% soluție salină). De asemenea, folosesc mediu Francis (2,5% agar peptonă de carne, 0,1% cistină, 1% glucoză și 5-10% sânge de iepure defibrinat), mediu de gălbenuș Drozhevkina semi-lichid (10% gălbenuș de pui și 90% ser fiziologic steril), pește din sânge - drojdie agar cu glucoză și cistină etc.

Bacteria tularemie este un aerob strict, temperatura optimă este de 36-37 0 C, pH-ul mediului este de 7,2-7,0. Pe un mediu de gălbenuș coagulat, cu creștere abundentă, microbii cresc sub forma unui înveliș subțire strălucitor, cu o suprafață întortocheată („shagreen”); cu creștere rară, cresc colonii mici sau convexe lucioase sau grupuri de colonii. Pe mediu Francis, cultura arată ca niște colonii mici (1-2 mm), rotunde, convexe, netede, strălucitoare, cu margini netede, de culoare albicioasă cu o tentă albăstruie; cresterea se observa dupa 2-3 zile. Coloniile de tulpini patogene au o formă de S. În mediile nutritive lichide, microbul tularemiei crește mult mai rău (doar pe suprafața mediului). Bacteriile se înmulțesc bine și în sacul vitelin al embrionului de pui în curs de dezvoltare.

Proprietăți biochimice. Bacteria tularemie nu are activitate biochimică pronunțată. Capacitatea de a fermenta carbohidrații și alcoolii este limitată și poate fi detectată în mod fiabil numai pe medii speciale dense, cu un conținut redus de proteine ​​și un anumit pH. Suport media nu este potrivit pentru acest scop. Microbul fermentează glucoza, maltoza și, în unele cazuri, levuloza și manoza cu formarea de acid fără gaz; nu fermentează lactoza, zaharoza, ramnoza, manitolul; formează hidrogen sulfurat și reduce tionina, albastrul de metilen, verdele de malachit.

Structura antigenică. Variantele patogene ale agentului cauzal al tularemiei (forma S) au două complexe antigenice localizate pe suprafața celulei. Primul dintre ele - antigenul Vi - conține lipide și proteine, determină virulența și imunogenitatea microbilor; al doilea - antigenul O - este localizat în peretele celular și în stratul asemănător unei capsule al bacteriei, o glicoproteină termostabilă. Ambele complexe au proprietăți alergene și antigenice, induc formarea de anticorpi aglutinanți, precipitatori și fixatori ai complementului, precum și hipersensibilitate de tip întârziat. Funcția alergenului în această bacterie este îndeplinită de un complex polizaharid-polipeptid. Antigenul Vi al variantelor patogene ale agentului cauzal al tularemiei este similar cu antigenul similar al Brucella.

Durabilitate. ÎN apa sau solul umed la 4 0 C ramane fara scadere a virulentei peste 4 luni, in apa la 20-25 0 C - 10-15 zile, in cereale si paie la temperaturi sub 0 0 C - pana la 6 luni, la 8-12 0 C – 56 de zile, la 20-30 0 C – nu mai mult de 20 de zile. Agentul patogen este viabil în carnea congelată până la 93 de zile, în lapte și smântână la 8-10 0 C timp de cel puțin 3 săptămâni, în laptele congelat până la 104 zile. În cadavrele înghețate ale animalelor care au murit din cauza tularemiei - peste 3 luni, în pielea lor la 8-12 0 C - mai mult de o lună, la 32-33 0 C - 1 săptămână. Microbul este rezistent la uscare.

Deosebit de sensibil la alcoolul etilic (moare în 0,5-1 minute). Sensibil la dezinfectanți - lisol, fenol, creolină, dar mai ales la înălbitor. Nerezistent la multe antibiotice - streptomicina, cloramfenicol, tetraciclina, neomicina, kanamicina; rezistent la penicilină.

Patogenitate. Bacteria este patogenă pentru iepuri de câmp, volei, șoareci de casă, gopher și șobolani. Animalele de fermă sunt relativ rezistente la tularemie, se îmbolnăvesc sporadic, iar boala apare adesea într-o formă latentă. Mieii și purceii sunt cei mai sensibili; caii și măgarii sunt afectați. La bovine, boala este însoțită de ganglioni limfatici măriți și mastita. Bivolii, cămilele și renii sunt sensibile. Oile adulte sunt rezistente la boală, caprele sunt și mai rezistente. Iepurii sunt sensibili; boala apare fără semne caracteristice și poate fi asemănătoare pseudotuberculozei și formei cronice de pasteureloză. Dintre păsări, puii, în special puii, sunt sensibili. Cobaii și șoarecii albi sunt susceptibili la infecție.

Oamenii suferă și de tularemie, dar boala este relativ benignă și pacientul nu reprezintă un pericol pentru ceilalți.

Adevărata exotoxină a acestui microb nu a fost izolată, dar el sintetizează enzime patogene: asparaginaza, hialuronidază, glutacinaza, deaminaza, transamidaza, uronidaza, fibrinolizinele. Uronidaza se găsește numai în tulpini virulente. Se crede că efectul patogen al microbilor tularemiei se datorează în principal endotoxinei.

Patogeneza. Infecția are loc prin căi alimentare, prin aer-praf și pe căi transmise prin vectori. Bacteriile pot pătrunde în organism prin pielea intactă, conjunctiva și tractul respirator. Agentul patogen, înmulțindu-se la locul de penetrare, intră mai întâi în ganglionii limfatici, apoi pătrunde în sânge și provoacă septicemia. Complexul de simptome este determinat de rezistența la specii și vârstă a animalelor, precum și de capacitatea agentului patogen de a se multiplica în organe bogate în elemente reticuloendoteliale.

Date epizootologice. Boala este înregistrată în America, Europa, Asia și Africa, precum și în Rusia. Tularemia apare cel mai adesea în anii de reproducere în masă a rozătoarelor. Rozătoarele (șoareci de câmp, șoareci de casă, șobolani cenușii și de apă, șobolani muschi etc.), iepuri de câmp, iepuri etc. sunt susceptibili la tularemie; creează un rezervor al agentului patogen în natură. Animalele de fermă se îmbolnăvesc și ele, în special oile, iar mieii sunt cel mai grav bolnavi. Printre animalele de laborator, șoarecii și șobolanii albi, cobai și iepuri sunt sensibili. Câinii și pisicile sunt insensibile la agentul patogen. O persoană foarte sensibilă.

Boala este înregistrată sporadic la animalele de fermă, iar la rozătoare, în special șobolani, se manifestă ca o epizootie. Focarele de tularemie sunt înregistrate sezonier (de obicei primăvara și toamna) în perioada de reproducere în masă și migrație intensivă a rozătoarelor, precum și în perioada de activitate a insectelor suge de sânge. Focarele naturale de tularemie, care rămân active până la 50 de ani sau mai mult, sunt limitate la zonele locuite de rozătoare. Focarele de tularemie la oi sunt precedate de epizootii ale acestei boli la iepuri.

Diagnosticul pre-mortem. Manifestarea clinică se observă numai la ovine. La alte animale se desfășoară latent. La oi se observă o creștere a temperaturii până la 41,6 0 C, depresie, instabilitate a mersului și tragerea ulterioară a spatelui, paralizie, diaree, anemie a membranelor mucoase și comă.

Diagnosticul post-mortem. Fenomene de bacteriemie cu afectarea vaselor de sânge ale plămânilor, splinei, inimii și ganglionilor limfatici. Ganglionii limfatici sunt puternic măriți, cu noduli sau abcese necrotice.

Diagnosticul de laborator. La colectarea, livrarea la laborator și testarea materialului pentru tularemie, se respectă măsurile de precauție prevăzute în regulile de lucru cu infecții deosebit de periculoase. Materialul pentru studiu este ficatul, rinichii, splina, ganglionii limfatici măriți prelevați din cadavrele animalelor mari; Cadavrele de rozătoare sunt trimise în întregime.

Schema de examinare a materialelor include bacterioscopia, izolarea culturilor pure și testarea biologică.

Frotiurile de amprentă din organele animalelor sunt colorate conform Romanovsky-Giemsa; ia în considerare acumulările mari de cocobacterii de culoare liliac. Bacterioscopia trebuie considerată o metodă orientativă.

Pentru a indica bacteriile, se folosește o reacție de imunofluorescență directă, totuși, această metodă este una de semnal, iar rezultatele pozitive trebuie confirmate prin izolarea unei culturi a agentului patogen. În acest scop, materialul patologic este inoculat pe medii nutritive speciale (mediu de gălbenuș pliat McCoy, mediu Drozhevkina și Emelyanova). Totodată, se fac inoculări de control pe MPA și în MPB, care se incubează în condiții aerobe și anaerobe la temperatura de 37 0 C. La inoculare abundentă, creșterea bacteriilor tularemie pe mediul gălbenuș coagulat apare sub formă de o acoperire continuă după 18-24 ore și atinge maxim după 2-3 zile; cu inoculare rară, coloniile individuale sunt vizibile în ziua 3-5 și mai târziu. Prin urmare, se recomandă incubarea mediului semănat timp de 10-14 zile. Pe mediul Drozhevkina, microbul crește difuz, iar prezența microbilor este controlată prin examinarea microscopică a frotiurilor. O cultură proaspăt izolată este identificată prin proprietăți morfologice (cocobacterii nemotile), tinctoriale (bacterii Gram-negative), model de creștere pe mediu de gălbenuș coagulat, lipsa creșterii pe medii nutritive universale, precum și prin rezultatele eprubetei RA cu ser aglutinant specific.

Probă biologică. Cea mai sensibilă și fiabilă metodă de detectare a bacteriilor tularemie în orice material. Ei infectează șoarecii albi, mai rar cobai. O suspensie de bucăți de organe și ganglioni limfatici se administrează în doză de 0,5 ml subcutanat sau intraperitoneal sau se freacă într-o zonă proaspăt tăiată a pielii. Șoarecii albi mor după 3-4 zile, uneori după 8-12 zile, cobai - în 4-6 zile, cu material slab infectat - în 8-20 de zile.

Diagnosticul serologic. Se efectuează folosind reacții de aglutinare, precipitare, hemaglutinare indirectă și neutralizare a anticorpilor.

RA este o metodă destul de precisă de testare a tularemiei. Antigenul este tularemia diagnosticum, preparat din celule microbiene ucise cu formaldehidă. RA este diagnosticată în două moduri: eprubetă și picătură de sânge. Titlurile diagnostice pentru tularemie trebuie luate în considerare: pentru ovine – 1:25, pentru bovine și porcine – 1:100.

Reacția de hemaglutinare indirectă (IRHA) se realizează cu hematii sensibilizați cu antigen de tularemie sau cu un anticorp eritrocitar diagnosticum. În primul caz, se utilizează pentru studierea serurilor animalelor agricole și sălbatice pentru prezența anticorpilor specifici, în al doilea - pentru determinarea antigenului în cadavrele animalelor. Reacția de precipitare are o sensibilitate relativ scăzută și este utilizată în principal în studiul cadavrelor de rozătoare.

Metoda alergică. Hipersensibilitatea de tip întârziat la animalele cu tularemie se dezvoltă precoce (până în a cincea zi de boală) și persistă mult timp, astfel încât metoda alergică poate fi utilizată pentru diagnosticul precoce și retrospectiv. Alergenul este tularina; medicamentul se administrează intradermic, reacția este luată în considerare de două ori - după 24 și 48 de ore.

Prevenirea specifică. Animalele care s-au recuperat după boală dezvoltă o imunitate stabilă și de lungă durată, care se bazează pe mecanisme tisulare și umorale. Aglutininele se găsesc în serurile animalelor recuperate, iar reacțiile de apărare celulară se formează destul de devreme.

Pentru imunizarea preventivă a oamenilor se folosește un vaccin viu uscat împotriva tularemiei, propus în 1946 de N. A. Gaisky și B. Ya. Elbert.

Nu a fost dezvoltat niciun vaccin pentru animalele de fermă.

Evaluare și măsuri veterinare și sanitare. Animalele bolnave nu au voie să fie sacrificate. Dacă tularemia este detectată după sacrificare, toate produsele de sacrificare cu piele sunt distruse. Carcasele și organele suspectate a fi contaminate cu agenți patogeni de tularemie sunt trimise spre eliminare.

Serviciul veterinar al întreprinderii este obligat să raporteze (în conformitate cu procedura stabilită) departamentul veterinar al departamentului regional (teritorial) al agriculturii, Ministerul Agriculturii al Federației Ruse sau departamentul veterinar principal al ministerului și sănătății locale. autoritățile de la sediul întreprinderii despre toate cazurile de depistare a animalelor cu tularemie înainte sau după sacrificare.

Pentru a dezinfecta locurile de sacrificare, utilizați o soluție de 2% de sodă caustică sau potasiu (70 0 C), o soluție de 3% de xilonafit-5 și o soluție de 2% de formaldehidă.